接種細胞:轉染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。關于轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!哪個品牌的PEI轉染試劑性價比更高?四川液體PEI轉染試劑試用裝
產品簡介:Transporter 5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉染試劑)溶液,由PEI MAX配置而成,采用0.1um PES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞,并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產。Transporter 5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲(SF9、SF21) 等真核細胞系,可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,所以較大的質粒也可以成功地轉染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準備時間,加快項目進度。經過嚴格的性能檢測,確保品質,在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產的轉染試劑。產品特點:非GMP,研究級PEI轉染試劑溶液;高轉染效率;無縫過渡到MAXgene GMP;易放大,可預測產量;用于工藝開發(fā),臨床前和早期臨床研究。如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!進口PEI轉染試劑試用裝可用于臨床申報哪里有賣GMP等級的PEI轉染試劑?
PolysciencesPEI轉染試劑優(yōu)勢:高質量的R&D和cGMP等級產品l高轉染效率,低細胞毒性;MAXgene符合cGMP標準和ISO13485質量管理體系;經過驗證的生產工藝;全合成,無動物源成分;高性價比,適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產的各個階段l嚴格控制批間穩(wěn)定性;國內外已有多個項目進入臨床階段l具備殘留檢測方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEI MAX ,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來,經過眾多業(yè)內人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率,在重組抗體和病毒載體生產中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEI MAX是一種非GMP等級PEI轉染試劑,適用于基礎科學研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!
準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!?Transporter 5轉染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉染試劑(PEI)衍生物。
PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經費很有限,被逼無奈只能放棄脂質體2000,選擇PEI,以至于相當長的時間內,轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書,所用質粒盡量去內2.轉染時,一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中,順序不可錯,輕微混勻,靜止20min3.轉染后4小時,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高。PS:事實證明,PEI是可行的,已經做出穩(wěn)定細胞系了。更多關于PEI轉染試劑相關的信息,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!?如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!?PEI轉染試劑可以轉染哪些細胞?液體PEI轉染試劑試用裝適用于Hela細胞轉染
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PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來,經過眾多業(yè)內人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率,在重組抗體和病毒載體生產中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉染試劑,適用于基礎科學研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,采用0.1μmPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產。如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!四川液體PEI轉染試劑試用裝