云南PEI轉染試劑試用裝可進行批次驗證

產(chǎn)品簡介：Transporter 5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物，這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞，并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒，所以較大的質粒也可以成功地轉染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度。經(jīng)過嚴格的性能檢測，確保品質，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產(chǎn)的轉染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP，研究級PEI轉染試劑溶液；高轉染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預測產(chǎn)量；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！用PEI轉染試劑時出現(xiàn)沉淀什么原因?云南PEI轉染試劑試用裝可進行批次驗證

1、細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。2、制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應總體積為例。準備兩支1.5mL離心管，一管將質粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中，輕輕搖動平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3、培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)，16h左右可以觀測到報告基因的表達。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！廣東細胞轉染PEI轉染試劑試用裝中國地區(qū)代理Polysciences PEI轉染試劑的是誰？

注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內(nèi)質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?

PolysciencesPEI轉染試劑優(yōu)勢：高質量的R&D和cGMP等級產(chǎn)品l高轉染效率，低細胞毒性；MAXgene符合cGMP標準和ISO13485質量管理體系；經(jīng)過驗證的生產(chǎn)工藝；全合成，無動物源成分；高性價比，適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個階段l嚴格控制批間穩(wěn)定性；國內(nèi)外已有多個項目進入臨床階段l具備殘留檢測方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEI MAX ，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強。PEI MAX是一種非GMP等級PEI轉染試劑，適用于基礎科學研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！用PEI轉染時，一般和DNA的比例是?

接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多PEI相關產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！哪個品牌的PEI轉染試劑質量好？重慶PEI轉染試劑試用裝無批次差異

PEI轉染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物。云南PEI轉染試劑試用裝可進行批次驗證

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號：Mine-Bio?????。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?云南PEI轉染試劑試用裝可進行批次驗證