人源細(xì)胞模型開發(fā)糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)

Humancelldesign開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先，將每個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下，因?yàn)樵摬课皇侨祟愐认侔l(fā)育的允許部位。在6到8個(gè)月內(nèi)，所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤，這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比，原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離，用在大鼠胰島素啟動(dòng)子控制下表達(dá)hTERT的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，并移植到其他SCID小鼠中。這些小鼠在2至3個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)低血糖，胰島素陽性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞，并允許定義允許的培養(yǎng)條件，在這種條件下，可以在體外建立永生化細(xì)胞系。Huamn cell design(HCD)提供的糖尿病細(xì)胞模型具有高度穩(wěn)健且無批次效應(yīng)的特點(diǎn)。人源細(xì)胞模型開發(fā)糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)

人原代β細(xì)胞的可用性有限，從人胰島制劑中純化β細(xì)胞具有挑戰(zhàn)性。在嚙齒類動(dòng)物中，β細(xì)胞系自 20 世紀(jì) 70 年代初以來就已經(jīng)可用，并且在研究β細(xì)胞功能方面非常有用。然而，嚙齒動(dòng)物的β細(xì)胞并不是研究人類β細(xì)胞的理想選擇，因?yàn)槿祟惡蛧X動(dòng)物的β細(xì)胞在許多方面彼此不同。例如，在嚙齒類動(dòng)物中，胰島素由 2 個(gè)基因編碼，而在人類中，只有 1 個(gè)基因編碼。嚙齒動(dòng)物和人類β細(xì)胞的功能差異是由于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和磷酸化在葡萄糖感知中的相對(duì)作用不同。云南人胰腺B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型IFNg 和 IL1b 處理細(xì)胞 24 小時(shí)后進(jìn)行 RNA-seq 以檢查 EndoC-BH5 細(xì)胞對(duì)細(xì)胞因子的反應(yīng)性。

HCD是通過將人類胎兒胰腺芽移植到SCID小鼠的腎被膜下進(jìn)行β細(xì)胞系的構(gòu)建的。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺β細(xì)胞，無限接近天然人源胰島β細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上，在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)，對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑、Exendin-4刺激產(chǎn)生明顯增強(qiáng)，且可實(shí)現(xiàn)批量化生成，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。Human cell design成立于 2001年，專注于人源細(xì)胞模型開發(fā)，以助力科研和生物醫(yī)藥企業(yè)的發(fā)展。其中可作為糖尿病細(xì)胞模型的EndoC-BH5,EndoC-BH3,EndoC-BH1等人源胰島B細(xì)胞為其優(yōu)勢產(chǎn)品。

EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等細(xì)胞可在體外在葡萄糖劑量刺激下產(chǎn)生正常的胰島素分泌反應(yīng)，對(duì)GLP-1R/GLP-1等胰島素刺激因子產(chǎn)生正常響應(yīng)，可以響應(yīng)細(xì)胞因子刺激，表達(dá)HLA-A2等T細(xì)胞受體，因此可用于糖尿病炎癥相關(guān)等多種藥物開發(fā)實(shí)驗(yàn)。EndoC-BH5細(xì)胞可批量穩(wěn)定生產(chǎn)，因此可以進(jìn)行基于siRNA的高通量篩選研究中，用于鑒定出潛在的2型糖尿病藥物靶點(diǎn)。另外，Humancelldesign根據(jù)法國生物倫理立法收集人類胎兒組織，獲得法國生物醫(yī)學(xué)局（巴黎）的批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號(hào)為PFS08-005。糖尿病細(xì)胞模型可用于葡萄糖刺激的促胰島素分泌研究。

Humancelldesign（HCD）通過將永生化轉(zhuǎn)基因hTERT和SV40大T以及單純皰疹病毒-1胸苷激酶整合基因轉(zhuǎn)移至人胎兒胰腺中，產(chǎn)生EndoC-βH5細(xì)胞。擴(kuò)增后使用CRE ji huo去除永生化轉(zhuǎn)基因，并使用更昔洛韋消除剩余的未切除細(xì)胞，所得細(xì)胞作為可立即使用的EndoC-βH5細(xì)胞進(jìn)行分發(fā)。EndoC-βH5已經(jīng)成功進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組、免疫學(xué)和的功能測定。即用型EndoC-βH5細(xì)胞顯示出高效的葡萄糖依賴性胰島素分泌。歐洲四個(gè)du li實(shí)驗(yàn)室觀察并再現(xiàn)了強(qiáng)勁的10倍胰島素分泌指數(shù)。EndoC-βH5細(xì)胞響應(yīng)葡萄糖以動(dòng)態(tài)方式分泌胰島素。GLP1R和GIPR介導(dǎo)的信號(hào)增強(qiáng)葡萄糖刺激EndoC-βH5細(xì)胞的胰島素分泌。糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞以 1e2 105 細(xì)胞/孔接種到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室載玻片上。廣東均質(zhì)胰島細(xì)胞系糖尿病細(xì)胞模型

糖尿病細(xì)胞模型可用于類胰島構(gòu)建、糖尿病細(xì)胞模型構(gòu)建。人源細(xì)胞模型開發(fā)糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)

EndoC-βH5細(xì)胞是一種新型人類胰腺β細(xì)胞解決方案，可用于開發(fā)人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗(yàn)證平臺(tái)，產(chǎn)生流程為：DNA構(gòu)建，慢病毒載體產(chǎn)生，人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉(zhuǎn)導(dǎo)，移植到SCID小鼠的腎囊下，導(dǎo)致八個(gè)月后形成胰島素瘤，從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細(xì)胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養(yǎng)基中的βCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。使用胰蛋白酶（0.05%）每7天繁殖一次細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)分析表明所有EndoC-βH5細(xì)胞均呈胰島素陽性，并且在絕大多數(shù)細(xì)胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(dá)（分別為92.3%和90%）。EndoC-βH5細(xì)胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。人源細(xì)胞模型開發(fā)糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)