基于慢病毒載體的體外基因zhi liao已在臨床試驗中取得良好的效果,有望zhi yu一些造血系統(tǒng)的單基因遺傳病。通過提高靶細胞轉導效率和減少轉導中病毒載體量,基因zhi liao有效性、安全性和成本都可以得到改善。不同包膜糖蛋白偽型慢病毒載體通過與細胞膜表面的不同受體結合,促進病毒黏附和入胞,增強不同靶細胞的病毒轉導效率。此外病毒轉導增強劑可以在病毒進入細胞過程或進入后發(fā)揮作用,在提高轉導效率的同時使靶轉導基因在體內長期穩(wěn)定表達。為了達到研究目的,在轉導過程中加入轉導增強劑也能有效提高轉導效率。T細胞慢病毒轉導優(yōu)化方案
人間充質干細胞(MSCs)的慢病毒轉導可誘導長期轉基因表達,并為多種基因zhi liao應用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉導效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉導方案以應用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST和硫酸魚精蛋白是可替代的轉導增強劑,可以按照現行的GMP標準生產,且很容易應用于現有的轉導方案,并且曾被用于人類CD34+HSCs細胞的轉導研究。這里,我們研究了這些試劑用于脂肪來源MSC細胞的慢病毒轉導增qiang xiao果。我們發(fā)現LentiBOOST和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產生與polybrene相當甚至更高的轉導效率,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應用中MSCs慢病毒轉導效率的潛力。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!為提供更好的服務,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。T細胞慢病毒轉導優(yōu)化方案慢病毒轉導的特點是什么呢?
目前的基因&細胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式。根據統(tǒng)計,病毒載體約占進行臨床實驗的項目 65%;而慢病毒因無嚴重的臨床事故出現成為目前相對安全的病毒載體選擇之一。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細胞、容納外源性目的基因片段大、穩(wěn)定性強、免疫原性小等特點。大量研究表明,相對其他病毒載體,慢病毒gan ran效率高,更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細胞,其效率一般可以達到 30%-95% 以上。病毒顆的限制性攝取粒往往會降低基因或 shRNA 表達的成功率,并要求應用更高的病毒滴度。然而,增加病毒數量以促進表達可能會導致許多細胞類型的毒性副作用,并帶來不必要的昂貴成本。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉導增強劑,專為提高病毒基因轉導難轉的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導增強劑,歡迎咨詢曼博生物!
慢病毒ganran效率受到多種因素的影響,首先,考慮病毒包裝制備是否存在問題,比如外源基因是否正確,病毒滴度是否合格等。其次,考慮病毒運輸和保存方式是否得當,解凍病毒一定要在冰上進行,避免反復凍融,否則會影響病毒滴度;-80℃保存半年以上需要重新測定滴度。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉導效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達到高ganran效率的保證,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數生長期的細胞進行ganran可提高ganran效率。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!什么是慢病毒轉導增強劑呢?
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了gan ran細胞的類型),再往里依次為基質蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒gan ran的xian zhu特點是gan ran個體在出現典型的臨床癥狀之前,大多經歷長達數年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質??商峁┧械霓D錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。為提供更好的服務,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產品業(yè)務的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。慢病毒轉導增強劑是什么呢?研究級慢病毒轉導效率
什么是慢病毒轉導增強劑?T細胞慢病毒轉導優(yōu)化方案
LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質交換和跨膜轉運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉導效率。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進行。更多產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!T細胞慢病毒轉導優(yōu)化方案