全基因組測(cè)序是對(duì)未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測(cè)序。全基因組預(yù)測(cè)的意義揭示了人類生、老、病和死的奧秘,使人類從根本上認(rèn)知疾病發(fā)生的原因,做到正確的調(diào)整疾病和盡早的預(yù)防疾病。每個(gè)人從開始就繼承了父母的DNA遺傳信息,并且攜帶一生,不易改變。全基因組測(cè)序通過運(yùn)用新一代高通量DNA測(cè)序儀,進(jìn)行10到20倍覆蓋率的個(gè)人全基因組測(cè)序,然后與人類基因組精確圖譜比較,得到完整的個(gè)人全基因組序列,破譯個(gè)人全部的遺傳信息的過程。全基因組測(cè)序覆蓋面廣,能檢測(cè)個(gè)體基因組中的全部遺傳信息,準(zhǔn)確性高。全基因組測(cè)序通過運(yùn)用新一代高通量DNA測(cè)序儀,進(jìn)行10到20倍覆蓋率的個(gè)人全基因組測(cè)序。國(guó)內(nèi)病毒全基因組測(cè)序排行
在哪些應(yīng)用場(chǎng)景需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序?在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。DNA病毒高通量測(cè)序分析公司病毒全基因組測(cè)序具有的特點(diǎn):更加貼合需求。
在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。
深度測(cè)序技術(shù)對(duì)科學(xué)研究范式相關(guān)影響:個(gè)性化醫(yī)學(xué)、P4醫(yī)學(xué)和準(zhǔn)確醫(yī)學(xué)等研究范式都是在近幾年深度測(cè)序技術(shù)迅猛發(fā)展的基礎(chǔ)上提出的。個(gè)人基因組測(cè)定的可行性,使得大眾有可能測(cè)定和分析自己的基因組、尋找到個(gè)人健康相關(guān)的基因風(fēng)險(xiǎn)因素,從而可以在生活習(xí)慣、飲食等方面提早進(jìn)行個(gè)性化預(yù)測(cè)和預(yù)防。由于互聯(lián)網(wǎng)的發(fā)展和即時(shí)檢驗(yàn)技術(shù)(point-of-care-testing,POCT)的應(yīng)用,人們可以通過網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行交流和參與到整個(gè)診療過程,這便是P4醫(yī)學(xué)的概念:預(yù)測(cè)性(predictive)、預(yù)防性(preventive)、個(gè)性化(personalized)及參與性(participatory)。高通量測(cè)序技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)測(cè)序一次**性的改變。
病毒基因組測(cè)序的標(biāo)準(zhǔn)有:測(cè)序的完成程度,決定著基因組的下游應(yīng)用,包括設(shè)計(jì)診斷產(chǎn)品、反向遺傳系統(tǒng)以及開發(fā)調(diào)整對(duì)策等。研究團(tuán)隊(duì)希望能夠通過五條標(biāo)準(zhǔn)來填補(bǔ)這樣的空白,這些標(biāo)準(zhǔn)涵蓋了完成病毒基因組的整個(gè)階段,使用不依賴測(cè)序技術(shù)的簡(jiǎn)單條件規(guī)定了五個(gè)類別。不同的測(cè)序技術(shù)可能會(huì)很快淘汰更新,因此我們這些標(biāo)準(zhǔn)沒有關(guān)聯(lián)任何特定的測(cè)序平臺(tái),可以長(zhǎng)時(shí)間的使用下去。一種基于二代測(cè)序的pedv病毒基因組分析方法。目前現(xiàn)有的pedv分析方法兩方面的局限,第1,pedv病毒二代測(cè)序數(shù)據(jù)中存在部分甚至大量的宿主豬的基因組序列,宿主基因組的污染會(huì)影響pedv病毒基因組的拼接。第二,拼接預(yù)測(cè)病毒基因結(jié)構(gòu)的方法主要是genemarks等預(yù)測(cè)軟件,但由于pdev病毒基因組中基因相互重疊,其中基因內(nèi)部還存在ribosomalframeshift現(xiàn)象,現(xiàn)有的基因預(yù)測(cè)軟件并不能準(zhǔn)確識(shí)別出正確的基因結(jié)構(gòu)。分析不同大小和不同樣品類型的UViGs對(duì)于探索病毒基因組序列空白是有價(jià)值的。國(guó)內(nèi)病毒全基因組測(cè)序排行
高通量測(cè)序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測(cè)序和分析。國(guó)內(nèi)病毒全基因組測(cè)序排行
全基因組測(cè)序要注意的事項(xiàng):全基因組測(cè)序是對(duì)未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測(cè)序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長(zhǎng)度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對(duì)插入片段進(jìn)行測(cè)序。然后對(duì)測(cè)得的序列組裝成Contig,通過Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測(cè)序深度與覆蓋度、測(cè)序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測(cè)序深度(Sequencingdepth)是指測(cè)序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評(píng)價(jià)測(cè)序量的指標(biāo)之一。測(cè)序深度與基因組覆蓋度之間是一個(gè)正相關(guān)的關(guān)系,測(cè)序帶來的錯(cuò)誤率或假陽性結(jié)果會(huì)隨著測(cè)序深度的提升而下降。測(cè)序的個(gè)體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測(cè)序深度在50X~100X以上時(shí),基因組覆蓋度和測(cè)序錯(cuò)誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。國(guó)內(nèi)病毒全基因組測(cè)序排行