病毒二代測(cè)序原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-11-14

RNA/DNA病毒測(cè)序?qū)Σ《净蚪M進(jìn)行測(cè)序是快速了解病毒突變、毒力變化、病毒型別的有效方法??梢愿鶕?jù)病毒基因組大小和類型,采用PCR、RT-PCR或shotgun測(cè)序法,對(duì)病毒的部分或全長基因組測(cè)序,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。服務(wù)標(biāo)準(zhǔn):測(cè)出的序列準(zhǔn)確性在99%以上;病毒全基因組測(cè)序測(cè)出序列在總基因組大小95%以上;數(shù)小于5個(gè);Shotgun測(cè)序的覆蓋度在6以上;PCR和RT-PCR測(cè)序達(dá)到2。服務(wù)說明:1、提供病毒DNA或RNA作為樣品。2、PCR測(cè)序的DNA樣品總量大于5μg,濃度大于20ng/μl。DNA無降解。3、Shotgun測(cè)序法的DNA樣品總量大于20μg,濃度大于100ng/μl。DNA無降解。4、用RT-PCR和PCR測(cè)序法在提供參考序列時(shí)需同時(shí)提交樣品部分序列與參考序列的比對(duì)文件,確保同源性在95%以上。


病毒全基因組測(cè)序平臺(tái),鍛煉出—批精通測(cè)序的檢測(cè)隊(duì)伍。病毒二代測(cè)序原理

病毒準(zhǔn)種的漂變將使毒株的特點(diǎn)及傳播方式發(fā)生改變,給現(xiàn)有的檢測(cè)手段和防治措施帶來嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。新一代高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)使得檢測(cè)某個(gè)物種的混合PCR產(chǎn)物中低頻率的變異體十分便利它的出現(xiàn)加快了研究準(zhǔn)種的規(guī)律性和影響因素的步伐。新一代測(cè)序儀將以往的測(cè)序費(fèi)用降低了好幾個(gè)數(shù)量級(jí)。鑒于此,以前只有大型測(cè)序中心才能夠開展的項(xiàng)目,現(xiàn)在在小型實(shí)驗(yàn)室里也能順利進(jìn)行了,按照目前的發(fā)展速度,新一代高通量測(cè)序技術(shù)有望給生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域帶來**性的變革。鄭州病毒序列測(cè)序方法探普生物病毒測(cè)序具備商務(wù)流程通暢的優(yōu)點(diǎn)。

需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的應(yīng)用場(chǎng)景:在探普生物長時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。


高通量測(cè)序技術(shù)具有的作用:高通量測(cè)序技術(shù)在冠狀病毒的鑒定中發(fā)揮了重要作用,先通過該技術(shù)確認(rèn)了該病原為以前未知的β冠狀病毒,其次確認(rèn)了該病毒與蝙蝠相關(guān)冠狀病毒ZC45和ZXC21密切相關(guān),同源性約為88%,后高通量測(cè)序?yàn)楹罄m(xù)的診斷提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。高通量測(cè)序能否定向檢測(cè)細(xì)菌病毒等微生物?例如某人有皮膚病,提取組織,能否通過高通量測(cè)序來檢測(cè)后列出所有的致病菌?;蛘弋?dāng)懷疑的時(shí)候,在人體組織中檢測(cè)是否有某種特定的細(xì)菌或者病毒。(不求原理),就是想知道現(xiàn)在的測(cè)序技術(shù)能否替代傳統(tǒng)臨床檢驗(yàn)方法。相比傳統(tǒng)培養(yǎng)等方法,對(duì)樣本的全微生物檢測(cè),或者特定微生物檢測(cè),基因測(cè)序技術(shù)目前的時(shí)間消耗,準(zhǔn)確率,和金錢成本大概如何。可以定向檢測(cè),用特異引物就可以。


二代測(cè)序單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量,因此也稱為高通量測(cè)序。

高通量測(cè)序在病毒準(zhǔn)種研究中如何應(yīng)用 在采用高通量測(cè)序技術(shù)研究準(zhǔn)種耐藥性方面,人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯(cuò)配傾向,造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個(gè)堿基對(duì)替換突變。被侵染的個(gè)體中存在非常巨大的病毒群,每天有1010個(gè)病毒粒子產(chǎn)生和死亡,在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個(gè)多樣性的群,即準(zhǔn)種。高通量測(cè)序是研究大群體中序列突變體特征的先進(jìn)方法,它的一種應(yīng)用是對(duì)個(gè)體抗病毒治療失敗時(shí)產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。病毒全基因組測(cè)序具有的特點(diǎn):獨(dú)有的一定定量技術(shù),實(shí)現(xiàn)病原定量分析.國內(nèi)病毒序列測(cè)序分析哪家好

測(cè)序覆蓋度是反映測(cè)序隨機(jī)性的指標(biāo)之一。病毒二代測(cè)序原理

病毒(Virus)由一種核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)(Protein)構(gòu)成或由蛋白質(zhì)構(gòu)成(如朊病毒)。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成,可分為單鏈DNA病毒(ssDNA)、雙鏈DNA病毒(dsDNA)、單鏈RNA病毒(ssRNA)、雙鏈RNA病毒(dsRNA)和蛋白質(zhì)病毒(如朊病毒)。根據(jù)宿主類型的不同,可以分為噬菌體(細(xì)菌病毒)、植物病毒(煙花葉病毒)和動(dòng)物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因組測(cè)序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量測(cè)序技術(shù),對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測(cè)序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列,解析編碼信息,并獲得相應(yīng)的變異信息。


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