化學方法比物理方法改。聯(lián)度高,且能獲得均勻一致的交聯(lián),對調(diào)節(jié)、控制膠原的各性質(zhì)均有效。已廣泛應用于各種化學試劑交聯(lián)膠原,以提高其交聯(lián)度、力學性能及生物相容性?;瘜W改性法具體又可分為使用化學試劑交聯(lián)、側(cè)鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學試劑交聯(lián)法中常用的化學交聯(lián)劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等,其中戊二醛是應用較比較廣的試劑,大量實驗證明:戊二醛能提供有效交聯(lián),但有細胞毒性,且其用量難以控制。另外,隨著交聯(lián)度的增加,吸水能力和膨脹度卻會降低。?;B氮化物、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等,不會引入明顯的毒性,且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見報道中,多使用單一交聯(lián)劑對膠原蛋白交聯(lián)改性,但也有使用混合交聯(lián)劑的,如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題,篩選出環(huán)氧丙烷化學改性戊二醛處理生物瓣的方法,可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動物實驗表明,經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機械抗張強度、免疫原性測試為陰性,符合臨床應用。 右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),使膠原具有很高的拉伸強度。北京骨膠原蛋白廠家
不同分子量分布膠原蛋白溶液的黏度與溶質(zhì)濃度、溶劑、pH、溫度和外加電解質(zhì)有關(guān)。在等電點時膠原蛋白溶液的黏度比較低,pH值低于或高于等電點時,膠原蛋白及多肽均將帶一定電荷,溶液的黏度相應增大,離等電點越遠,溶液的黏度越大;不同分子量分布膠原蛋白及多肽溶液的黏度均隨溫度升高而下降。膠原蛋白分子量越大,濃度越大,溶液的黏度越高,高分子量膠原蛋白溶液的黏度隨濃度增加呈指數(shù)上升,而低分子量膠原蛋白溶液的黏度則隨濃度增加近似直線上升;在膠原蛋白及多肽溶液中加入電解質(zhì)會導致其黏度明顯上升。膠原蛋白的水解產(chǎn)物含有多種氨基酸,其中以甘氨酸較為豐富。其次為丙氨酸、谷氨酸和精氨酸,半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及蛋氨酸等必需氨基酸含量低,因此,膠原蛋白屬不完全蛋白質(zhì)。水解豬皮膠原所得的肽類產(chǎn)物中含有19種氨基酸,其中包括7種成人必需氨基酸和2種幼兒必需的半必需氨基酸;而且氨基酸總量高達90%以上。在八種人體必需氨基酸中含有六種:異亮氨酸(Ile)為,亮氨酸(Leu)和苯丙氨酸(Phe)為,纈氨酸(Val),蘇氨酸(Thr)為,賴氨酸(Lys)為。 福建小分子膠原蛋白肽廠家酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法。
酸法處理時,反應強烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時,根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準確控制酸度、溫度、時間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應用DEAE-SephadexA-50進行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。
海南省華上生物科技有限公司,是一家專業(yè)從事生產(chǎn)加工膠原蛋白肽的企業(yè)。公司可以生產(chǎn)加工魚膠原蛋白肽、深海魚低聚肽、牛骨髓肽、大豆肽、牡蠣肽、蠶蛹肽、豌豆肽等等膠原蛋白肽制品。公司秉承“用效果說話、用口碑經(jīng)營”的宗旨,用質(zhì)量的產(chǎn)品給消費者以信賴,用質(zhì)量的服務(wù)給消費者以安心,為人類的健康美麗保駕護航。海南省華上生物科技有限公司旗下生產(chǎn)的膠原蛋白肽系列產(chǎn)品中,以膠原三肽(固體飲料)為表示的重點產(chǎn)品。膠原三肽,原料是由豬皮、魚皮,通過先進的生物工程技術(shù)制備而成的膠原蛋白較小結(jié)構(gòu)單位,是一種含有甘氨酸、脯氨酸(或羥脯氨酸)外加一個其他氨基酸的三肽。簡單的說,膠原三肽其實就是利用先進的生物工程技術(shù)截取大的膠原蛋白分子中的對皮膚有用的小分子結(jié)構(gòu)。其結(jié)構(gòu)可以簡單的表示為Gly-x-y。其平均分子量為280道爾頓,由于膠原三肽的分子量很小,因而能夠被人體充分吸收,與此同時,膠原三肽還能夠極有效的滲入角質(zhì)層,真皮層和頭發(fā)根部細胞內(nèi)。 膠原蛋白還具有良好的吸油性、起泡性和吸水性等。
膠原的相對分子質(zhì)量大,電泳圖有3條泳帶,在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈,在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對分子質(zhì)量可達100kD,1個膠原分子相對分子質(zhì)量為300kD。多肽分子量的測定方法常用SDS-PAGE,凝膠色譜法以及質(zhì)譜法。有人采用凝膠過濾色譜法測定脫鉻革屑中膠原水解產(chǎn)物分子量分布在。飛行時間質(zhì)譜法測定比目魚皮膠原寡肽分子量的分布主要集中在~。動物蛋白酶水解后的膠原多肽的分子量在2~7kD,比植物蛋白酶水解的膠原多肽分子量范圍更廣。膠原的熱穩(wěn)定性是指測定其在水系中纖維的熱收縮溫度(Ts),或溶液中分子的熱變性溫度(Td)。Ts和Td之差一般在20~25℃,而Ts值較Td值容易測定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度,另外還與其亞氨基酸(脯氨酸和羥脯氨酸)的含量有關(guān),尤其是羥脯氨酸含量,它們之間存在正相關(guān),冷水性魚類的羥脯氨酸含量比較低,所以冷水性魚類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚類,而又都低于陸生動物。但魚皮膠原蛋白與魚肉膠原蛋白相比,其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右,這與肌肉膠原中脯氨酸的羥基化率較真皮膠原高有關(guān)。有人測定了多種魚皮可溶性膠原蛋白的氨基酸組成。 皮膚的光澤取決于含水量,膠原三肽良好的保水能力使皮膚水潤亮澤,散發(fā)健康的光彩。福建骨膠原蛋白
膠原三肽的分子量極小。北京骨膠原蛋白廠家
水解膠原蛋白和膠原多肽也并不相同,可以近似認為是宏觀和微觀的關(guān)系。膠原蛋白分子經(jīng)水解后主要形成相對分子量較小的膠原多肽,由于膠原蛋白獨特的三股超螺旋結(jié)構(gòu),性質(zhì)十分穩(wěn)定,一般的加工溫度及短時間加熱都不能使其分解,從而造成其消化吸收較困難,不易被人體充分利用。水解后其吸收利用率可以提高很多,且可以促進食品中的其它蛋白質(zhì)的吸收。膠原多肽除了肽鏈的兩端含有未縮合的末端羧基和氨基外,在側(cè)鏈上還含有Lys的ε-NH2以及Asp和Glu的-COOH。膠原多肽可完全溶解于水(冷水亦可溶解),水溶液低粘度,在60%的高濃度下也有流動性,耐酸堿性能好,在酸、堿存在的情況下均無沉淀;耐高溫性能好,200℃加熱亦無沉淀,同時它還具有良好的吸油性、起泡性和吸水性等。 北京骨膠原蛋白廠家
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