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蛋白酶用于生成肽,用于質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)。這些應(yīng)用包括蛋白質(zhì)組學和生物制藥的深度表征。由于遺漏了切割和樣品制備誘導的偽影,傳統(tǒng)的蛋白酶并不總是理想的,因此需要具有不同特異性的蛋白酶工具箱。Genovis的GingisREX 是一種精氨酸特異性蛋白酶,可將蛋白質(zhì) C 末端消化為精氨酸殘基。與胰蛋白酶肽相比,所得肽更長,并可能導致序列覆蓋率增加。質(zhì)譜分析中蛋白酶的特異性對于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)集和避免復雜的數(shù)據(jù)解釋至關(guān)重要。作為模型底物,使用胰島素氧化β鏈來比較 GingisREX 和 ArgC 的酶特異性。胰島素氧化β鏈含有一個精氨酸和一個賴氨酸殘基。在RP-HPLC和質(zhì)譜法上分析GingisREX和ArgC的酶切肽。GingisREX在賴氨酸殘基上沒有酶活性或其他額外活性,即使在長時間孵育過夜后,酶與底物的比例也很高(1:5)。然而,ArgC在精氨酸殘基上顯示出主要活性,但在賴氨酸殘基上也可以看到酶消化。在酶與底物的比例為 1:20 和過夜孵育下,證明了 ArgC 的額外非特異性活性。在相同條件下,GingisREX未檢測到這種情況。數(shù)據(jù)證實了GingisREX精氨酸殘基的特異性活性,并顯示使用Arg-C在賴氨酸和其他殘基處的非特異性消化。倍篤生物代理多條產(chǎn)品線,用于聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對、AAV中和抗體、IdeS蛋白酶等。北京GingisKHANIdeS蛋白酶蛋白組學
抗體的氧化是可能影響抗體功能的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,需要密切定量和表征。它可能導致mAb的體內(nèi)半衰期、功效和穩(wěn)定性降低。Genovis的FabRICATOR(IdeS)消化產(chǎn)生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩(wěn)健性允許在受監(jiān)管的環(huán)境中監(jiān)測抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法(如mAb、ADC、生物類似藥和Fc融合蛋白)的表征、質(zhì)量控制、穩(wěn)定性測試、生產(chǎn)監(jiān)測和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個消化位點快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的片段池實現(xiàn)基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質(zhì)量控制可固定在即用型離心柱中山西FabRICATORIdeS蛋白酶抗體酶切降低樣品處理錯誤的風險,同時提高通量。
在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法,我們發(fā)現(xiàn),與簡單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優(yōu)勢。通過執(zhí)行中級描述,您可以生成從完整的質(zhì)量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優(yōu)勢。在對抗體進行完整質(zhì)量分析時,很難明確地識別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執(zhí)行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個結(jié)構(gòu)域,這是你在完整水平上無法做到的。
為什么客戶想在他們的工作試用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的高特異性(在鉸鏈下方有單個消化位點)以及它對IgG種和亞類表現(xiàn)出活性的事實使其成為高效表征一系列不同分子的理想工具。FabRICATOR的另一大優(yōu)勢是速度。在大多數(shù)IgG上,您可以在短短30分鐘內(nèi)生成F(ab’)2和Fc/2片段,這一速度簡化了方法開發(fā),并允許快速有效的中層表征,使客戶能夠在不比做完整質(zhì)量實驗長太多的時間內(nèi)獲得更多關(guān)于分子的信息。Genovis發(fā)現(xiàn)更多的緩沖液與溶液中的FabRICATOR消解相容(更多信息)。Genovis已經(jīng)測試了PBS和150mM醋酸銨,pH7,結(jié)果良好。并且應(yīng)該也適用于FabRICATORHPLC。然而,緩沖液的離子強度會影響抗體片段在FabRICATORHPLC(IdeS)色譜柱上的保留,并且IgG1亞基需要至少100-150mM鹽才能洗脫為單個窄峰。其他IgG亞類或融合蛋白可能需要對緩沖液組成進行一些優(yōu)化。Genovis將半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR(IdeS)固定在磁性瓊脂糖珠上,現(xiàn)在稱為FabRICATOR MagIC。
Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對其他物種的 IgG 也有活性,包括來自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,F(xiàn)abRICATOR的高特異性在某些情況下會使其對鉸鏈區(qū)域的突變敏感,并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,與 FabRICATOR 相比,F(xiàn)abRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對于這種抗體種類,F(xiàn)abULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。Genovis已經(jīng)測試了 PBS 和 150 mM 醋酸銨,并且也適用于FabRICATOR HPLC。河南IdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis 酶產(chǎn)品,被世界各地的科學家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。北京GingisKHANIdeS蛋白酶蛋白組學
Genovis集團由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達克上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關(guān)系。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,產(chǎn)品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學術(shù)團體的合作同樣有價值。北京GingisKHANIdeS蛋白酶蛋白組學