重慶FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗體酶切

來源: 發(fā)布時間:2024-05-10

用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1和IgA2m1,產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長,因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時間為過夜(16-18小時),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風(fēng)險。該酶在pH值為6.0至8.0時具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性?;钚詾?7°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。IgMBRAZOR 是IgM 特異性蛋白酶。重慶FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗體酶切

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Genovis集團由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達(dá)克上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關(guān)系。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,產(chǎn)品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學(xué)術(shù)團體的合作同樣有價值。GingisREXIdeS蛋白酶抗體酶切IgMBRAZOR酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人 IgM 進行中級分析,從而促進疫苗診斷等過程中的IgM表征和質(zhì)量控制。

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Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨特的酶,可在鉸鏈區(qū)域下方的特定位點消化IgG,產(chǎn)生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內(nèi)消化,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險。由于FabRICATOR在生理反應(yīng)條件下消化IgG,因此保留了免疫反應(yīng)性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長的反應(yīng)時間進行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發(fā),用于需要高標(biāo)準(zhǔn)和一致性的生物技術(shù)應(yīng)用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法。了解有關(guān)山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。

與IdeS不同,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區(qū)域。為了分別研究肽和 Fc 區(qū)域,從而鑒定結(jié)構(gòu)域特異性 PTM,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復(fù)雜性,使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進行連接子消化后,肽從Fc區(qū)域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點,這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,其中不同數(shù)量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外,還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化,但一式三份的酶解在獲得的不同F(xiàn)c/2變體的相對量中顯示出可重復(fù)的結(jié)果??上嵝愿缓拾彼岬娜诤系鞍走B接子,例如 Gly4Ser 和 GlyxSery (GS) 以及聚甘氨酸 (G) 接頭。

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蛋白酶用于生成肽,用于質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)。這些應(yīng)用包括蛋白質(zhì)組學(xué)和生物制藥的深度表征。由于遺漏了切割和樣品制備誘導(dǎo)的偽影,傳統(tǒng)的蛋白酶并不總是理想的,因此需要具有不同特異性的蛋白酶工具箱。Genovis的GingisREX 是一種精氨酸特異性蛋白酶,可將蛋白質(zhì) C 末端消化為精氨酸殘基。與胰蛋白酶肽相比,所得肽更長,并可能導(dǎo)致序列覆蓋率增加。質(zhì)譜分析中蛋白酶的特異性對于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)集和避免復(fù)雜的數(shù)據(jù)解釋至關(guān)重要。作為模型底物,使用胰島素氧化β鏈來比較 GingisREX 和 ArgC 的酶特異性。胰島素氧化β鏈含有一個精氨酸和一個賴氨酸殘基。在RP-HPLC和質(zhì)譜法上分析GingisREX和ArgC的酶切肽。GingisREX在賴氨酸殘基上沒有酶活性或其他額外活性,即使在長時間孵育過夜后,酶與底物的比例也很高(1:5)。然而,ArgC在精氨酸殘基上顯示出主要活性,但在賴氨酸殘基上也可以看到酶消化。在酶與底物的比例為 1:20 和過夜孵育下,證明了 ArgC 的額外非特異性活性。在相同條件下,GingisREX未檢測到這種情況。數(shù)據(jù)證實了GingisREX精氨酸殘基的特異性活性,并顯示使用Arg-C在賴氨酸和其他殘基處的非特異性消化。Genovis提供FabRICATOR (IdeS)驗證包。三種不同批次的凍干酶,用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。山東GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

能夠在中級表征中并行快速自動酶解多種抗體。重慶FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗體酶切

與IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點是人IgG1三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應(yīng),并鑒定翻譯后修飾。重慶FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗體酶切