翌科生物公司外泌體提取試劑盒系列產(chǎn)品（針對(duì)血清、血漿）。樣品準(zhǔn)備1.新鮮的血清、血漿樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可于室溫解凍后置于冰上待用。2.將血清、血漿樣品渦旋混勻，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求取適量體積轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃，1000×g離心10min，棄沉淀，并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。外泌體分離1.轉(zhuǎn)移樣本至新管，加入與血清/血漿等體積的ExosomeIsolationReagent；2.渦旋混勻，此步后溶液將變混濁。3.放入4℃冰箱靜置過(guò)夜；4.4℃，3220g離心60min，棄上清，外泌體沉淀存留在離心管底部；5.用適量PBS重懸外泌體沉淀，存放于4℃（不超過(guò)1周）或-20℃/-80℃（長(zhǎng)時(shí)間保存）。注意事項(xiàng)1、使用前需將ExosomeIsolationKit充分混勻。2、操作過(guò)程需佩戴一次性手套操作,盡量在超凈臺(tái)內(nèi)或潔凈的環(huán)境進(jìn)行。外泌體在分泌細(xì)胞和受體細(xì)胞間的穿梭介導(dǎo)了細(xì)胞間的生物分子傳遞。廣州做外泌體研發(fā)
外泌體膜染料：PKH67、PKH26
組成：方法一：外泌體直接染色1.適量（10ug，BCA法測(cè)量）外泌體溶于500ulDiluentC中（可以用DPBS代替）；2.適量的PKH26（10ug外泌體推薦用量不超過(guò)1ul）染料溶于等體積的DiluentC中（可以用DPBS代替），溫和吹打混勻；3.將步驟2中的溶液加入1中并迅速吹打混勻。4.避光，室溫靜置孵育5-10min；5.加入等體積（2ml）的血清（exosomefree），或者1%BSA終止染色反應(yīng)；6.使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結(jié)合的PKH26染料。方法二：通過(guò)細(xì)胞染色間接對(duì)外泌體染色1.2×107細(xì)胞500g，5min離心，盡量棄去上清。2.加入1mlDiluentC，溫和吹打混勻。3.將4ulPKH26儲(chǔ)存液加入1mlDiluentC中（可以用DPBS代替），溫和吹打混勻；4.將步驟2中制備的細(xì)胞懸液加入步驟3中的制備的PKH26工作液，快速吹打混勻后室溫靜置孵育5min；5.加入等體積（2ml）的血清（exosomefree），或者1%BSA終止染色反應(yīng)；6.使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結(jié)合的PKH26染料。注意：染色后的外泌體請(qǐng)立即使用或儲(chǔ)存于-80℃ 高校哪家做外泌體公司外泌體提取找哪個(gè)公司做？
外泌體提取，PEG-base沉淀法，聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。通過(guò)差速超速離心法（DifferentialUltracentrifugation）從細(xì)胞培養(yǎng)基上清或血漿血清中提取外泌體。
外泌體提取試劑盒 （細(xì)胞培液）本說(shuō)明書適用于翌科生物公司外泌體提取試劑盒系列產(chǎn)品（針對(duì)細(xì)胞培液）。
樣品準(zhǔn)備1.新鮮的細(xì)胞培液樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可于室溫解凍后置于冰上待用。2.將細(xì)胞培液樣品渦旋混勻，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求取適量體積轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃，1000×g離心10min，棄沉淀，并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離1.轉(zhuǎn)移樣本至新管，加入與細(xì)胞培夜等體積的ExosomeIsolationReagent；2.渦旋混勻，此步后溶液將變混濁。3.放入4℃冰箱靜置過(guò)夜；4.4℃，3220g離心60min，棄上清，外泌體沉淀存留在離心管底部；5.用適量PBS重懸外泌體沉淀，存放于4℃（不超過(guò)1周）或-20℃/-80℃（長(zhǎng)時(shí)間保存）。
注意事項(xiàng)1、使用前需將ExosomeIsolationKit充分混勻。2、細(xì)胞培液樣品建議用0.22μm濾器過(guò)濾后再進(jìn)行外泌體提取操作。3、操作過(guò)程需佩戴一次性手套操作,盡量在超凈臺(tái)內(nèi)或潔凈的環(huán)境進(jìn)行。 翌科生物是專做外泌體檢測(cè)服務(wù),醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn),醫(yī)學(xué)模型構(gòu)建。
外泌體（exosome）*適用于通過(guò)特殊手段拿到的由胞內(nèi)體來(lái)源的釋放到細(xì)胞外的膜泡結(jié)構(gòu)。建議對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行細(xì)分時(shí)使用物理上的界定如小細(xì)胞外囊泡（sEV）和中/大細(xì)胞外囊泡（m/lEV），或者高密度囊泡（highdensity）和低密度囊泡（lowdensity）等，同時(shí)也建議使用表面蛋白來(lái)界定如CD63+CD81+細(xì)胞外囊泡等。當(dāng)使用exosomes等稱呼時(shí)應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)證明使用的“exosomes樣品”是由胞內(nèi)體途徑產(chǎn)生的。南京英瀚斯生物專業(yè)外泌體檢測(cè)相關(guān)儀器齊全。外泌體檢測(cè)服務(wù)-價(jià)格低-周期短-數(shù)據(jù)清晰。上海怎么做外泌體檢測(cè)
南京實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)平臺(tái)一站式外泌體檢測(cè)服務(wù)平臺(tái)。廣州做外泌體研發(fā)
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征，但無(wú)法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度；流式細(xì)胞儀可測(cè)定的粒徑大小為150nm以上，并不適合檢測(cè)游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺(tái)的納米顆粒追蹤分析(NanoparticleTrackingAnalysis,NTA)技術(shù)，快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度，為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過(guò)濾離心;三是密度梯度離心法；四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。廣州做外泌體研發(fā)
南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ)，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái)。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線，包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫(kù)、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子、細(xì)胞、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā)，服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司，是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。翌科生物作為翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ)，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái)。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線，包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫(kù)、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子、細(xì)胞、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā)，服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的企業(yè)之一，為客戶提供良好的外泌體提取，非編碼RNA試劑，檢測(cè)試劑，轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念，影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。翌科生物始終關(guān)注自身，在風(fēng)云變化的時(shí)代，對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠，高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信。