全自動(dòng)專業(yè)做外泌體分離

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-17

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外泌體是所有細(xì)胞產(chǎn)生的胞外小泡,攜帶核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和代謝物。它們是健康和疾病中細(xì)胞間近距離通訊的介質(zhì),影響細(xì)胞生物學(xué)的各個(gè)方面。外泌體的生物發(fā)生細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷,將一些細(xì)胞外成分和細(xì)胞膜蛋白包裹在一起,形成早期內(nèi)涵體(ESEs),這些ESEs可以與其他細(xì)胞器發(fā)生物質(zhì)交換,或者不同ESEs之間融合形成晚期內(nèi)涵體(LSEs),進(jìn)一步形成細(xì)胞內(nèi)多膜體(MVBs),其中會(huì)包含許多腔內(nèi)囊泡(ILVs),這些ILVs將來(lái)就可能會(huì)被釋放成為外泌體。中國(guó)怎么做外泌體分離翌科生物是做外泌體提取嗎?

外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以***普及。外泌體是大多數(shù)細(xì)胞分泌的40-150nm的膜泡,存在于細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測(cè)可找英瀚斯生物,測(cè)序、電鏡、粒徑分析都可做。

外泌體提取,PEG-base沉淀法,聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽(yáng)性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。通過(guò)差速超速離心法(DifferentialUltracentrifugation)從細(xì)胞培養(yǎng)基上清或血漿血清中提取外泌體。如何選擇一家好的做外泌體的公司?

外泌體的產(chǎn)生過(guò)程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見(jiàn)于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome。對(duì)于外泌體的作用,當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗**反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、**生長(zhǎng)于侵襲等各種生物過(guò)程中。外泌體研究的生物公司有哪些?高校專門(mén)做外泌體研究

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外泌體是細(xì)胞的外膜囊泡,是細(xì)胞外納米級(jí)膜囊泡的一個(gè)子集,直徑為30-150nm。根據(jù)其釋放機(jī)制和大小,EVs分為以下三種類型:外泌體(直徑小于150nm)、MVs/脫落顆粒(100~1000nm)和凋亡小體(500~4000nm)。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,包括免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和干細(xì)胞等。外泌體成分取決于來(lái)源、宿主健康和細(xì)胞外刺激。外泌體成分可以從原細(xì)胞轉(zhuǎn)移到靶細(xì)胞。外泌體中包含多種細(xì)胞成分,包括mRNA、miRNAs、HSP90和HSP70等等。全自動(dòng)專業(yè)做外泌體分離

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