做外泌體提取

來源: 發(fā)布時間:2022-02-21

外泌體提取試劑盒 (血清、血漿)。翌科生物公司外泌體提取試劑盒系列產(chǎn)品(針對血清、血漿)。外泌體是大小約為30-150納米的微小囊泡,存在于血清、血漿、唾液、尿液和母乳等體液中。傳統(tǒng)的外泌體提取方式,如超速離心等耗時長、操作繁瑣、得率低,本公司產(chǎn)品可便捷地從血清、血漿等樣本中提取外泌體,提取后的外泌體能用于細胞試驗、動物試驗、電鏡分析、NTA鑒定、Western Blot、RT-qPCR分析等。產(chǎn)品組分組分:ExosomeIsolationReagent貨號:EK-21001-10EK-21001-20EK-21001-50規(guī)格:10/20/50mL(針對血清、血漿)儲存條件:0-4℃(保質(zhì)期24個月) 翌科生物的外泌體檢測服務(wù),醫(yī)學(xué)實驗,醫(yī)學(xué)模型構(gòu)建做的怎么樣?誰知道?做外泌體提取

外泌體提取,PEG-base沉淀法,聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。通過差速超速離心法(DifferentialUltracentrifugation)從細胞培養(yǎng)基上清或血漿血清中提取外泌體。中國做外泌體服務(wù)南京哪家做外泌體研究的公司靠譜?

外泌體膜染料:PKH67、PKH26

組成:方法一:外泌體直接染色1.適量(10ug,BCA法測量)外泌體溶于500ulDiluentC中(可以用DPBS代替);2.適量的PKH26(10ug外泌體推薦用量不超過1ul)染料溶于等體積的DiluentC中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;3.將步驟2中的溶液加入1中并迅速吹打混勻。4.避光,室溫靜置孵育5-10min;5.加入等體積(2ml)的血清(exosomefree),或者1%BSA終止染色反應(yīng);6.使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結(jié)合的PKH26染料。方法二:通過細胞染色間接對外泌體染色1.2×107細胞500g,5min離心,盡量棄去上清。2.加入1mlDiluentC,溫和吹打混勻。3.將4ulPKH26儲存液加入1mlDiluentC中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;4.將步驟2中制備的細胞懸液加入步驟3中的制備的PKH26工作液,快速吹打混勻后室溫靜置孵育5min;5.加入等體積(2ml)的血清(exosomefree),或者1%BSA終止染色反應(yīng);6.使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結(jié)合的PKH26染料。注意:染色后的外泌體請立即使用或儲存于-80℃

外泌體在國家自然科學(xué)基金立項集中的領(lǐng)域還是**學(xué),近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在**的形成,耐藥性,檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運p-STAT3可促進結(jié)直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標(biāo)志物的可能性。此外,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項目中標(biāo)。翌科生物是做外泌體提取嗎?

外泌體沒有限定單一的分離手段,多種手段都可以進行細胞外囊泡的富集。《指導(dǎo)要求》編寫者們認為“高回收率,低特異性”的富集手段是指那些富集囊泡的同時會有大量的非囊泡組分被富集,甚至細胞的整個分泌組都會被摻入其中,歸入這一類的分離手段主要包括通過改變電荷或通過高聚物作用的沉淀試劑盒、低分子量截流的超濾分離、超長時間和超高離心力的超速離心等。目前較常用的外泌體提取方法是differentialcentrifugation(DC)——差速離心法。也有用試劑盒提取外泌體,但效率均不高。南京外泌體檢測服務(wù)公司,科研課題解決方案。中國怎么做外泌體研究

代做實驗,外泌體檢測服務(wù),實驗樣本檢測。做外泌體提取

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