高校做外泌體粒徑分析

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-25

外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome。對于外泌體的作用,當(dāng)時(shí)推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗**反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、**生長于侵襲等各種生物過程中。翌科生物的外泌體提取做的好不好?高校做外泌體粒徑分析

外泌體(Exosome)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;外泌體攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、RNA等重要信息,不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院李偉華等人在MolecularCancer雜志發(fā)表的有關(guān)外泌體研究的綜述:分別介紹了1、外泌體在慢性乙型肝炎至肝細(xì)胞*過程中的作用2、外泌體與肝細(xì)胞*的關(guān)系3、外泌體在肝*診斷和預(yù)后中的應(yīng)用4、外泌體在肝****中的應(yīng)用,對相關(guān)涉及的***研究內(nèi)容進(jìn)行總結(jié)以揭示外泌體在肝*的發(fā)***展,診斷和***中的重要性,為研究人員進(jìn)一步闡明外泌體在肝*中的作用機(jī)制,并促進(jìn)外泌體在臨床診斷中的應(yīng)用和肝*的***提供參考中國專門做外泌體服務(wù)告訴你如何選擇一家好的做外泌體的公司 !

外泌體是所有細(xì)胞產(chǎn)生的胞外小泡,攜帶核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和代謝物。它們是健康和疾病中細(xì)胞間近距離通訊的介質(zhì),影響細(xì)胞生物學(xué)的各個(gè)方面。外泌體的生物發(fā)生細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷,將一些細(xì)胞外成分和細(xì)胞膜蛋白包裹在一起,形成早期內(nèi)涵體(ESEs),這些ESEs可以與其他細(xì)胞器發(fā)生物質(zhì)交換,或者不同ESEs之間融合形成晚期內(nèi)涵體(LSEs),進(jìn)一步形成細(xì)胞內(nèi)多膜體(MVBs),其中會(huì)包含許多腔內(nèi)囊泡(ILVs),這些ILVs將來就可能會(huì)被釋放成為外泌體。

外泌存在于人類的生殖,妊娠和胚胎發(fā)育需要精細(xì)/動(dòng)態(tài)的細(xì)胞間通信。**、羊水、血液和母乳都含有具有假定功能的外泌體。精漿外泌體與精子成熟有關(guān)。分子譜顯示,microRNAslet-7a,let-7b,miR-148a,miR-375和miR-99a富集于來自多個(gè)人類捐贈(zèng)者的精漿來源外泌體中,這些miRNA與白細(xì)胞介素(IL-10和IL-13)的表達(dá)有關(guān),提高了外泌體在生殖道常駐免疫中發(fā)揮作用的可能性。精漿來源的外泌體也能抑制HIV-1***,可能是通過阻斷HIV早期蛋白轉(zhuǎn)錄***劑(Tat)的招募和HIV-1的后續(xù)轉(zhuǎn)錄。外泌體在分泌細(xì)胞和受體細(xì)胞間的穿梭介導(dǎo)了細(xì)胞間的生物分子傳遞。

外泌體膜染料:PKH67、PKH26

組成:方法一:外泌體直接染色1.適量(10ug,BCA法測量)外泌體溶于500ulDiluentC中(可以用DPBS代替);2.適量的PKH26(10ug外泌體推薦用量不超過1ul)染料溶于等體積的DiluentC中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;3.將步驟2中的溶液加入1中并迅速吹打混勻。4.避光,室溫靜置孵育5-10min;5.加入等體積(2ml)的血清(exosomefree),或者1%BSA終止染色反應(yīng);6.使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結(jié)合的PKH26染料。方法二:通過細(xì)胞染色間接對外泌體染色1.2×107細(xì)胞500g,5min離心,盡量棄去上清。2.加入1mlDiluentC,溫和吹打混勻。3.將4ulPKH26儲(chǔ)存液加入1mlDiluentC中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;4.將步驟2中制備的細(xì)胞懸液加入步驟3中的制備的PKH26工作液,快速吹打混勻后室溫靜置孵育5min;5.加入等體積(2ml)的血清(exosomefree),或者1%BSA終止染色反應(yīng);6.使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結(jié)合的PKH26染料。注意:染色后的外泌體請立即使用或儲(chǔ)存于-80℃ 翌科生物做外泌體檢測服務(wù)怎么樣?北京怎么做外泌體研發(fā)

翌科生物是做外泌體提取嗎?高校做外泌體粒徑分析

外泌體Exosome是由活細(xì)胞分泌的,它是一種亞細(xì)胞成分,組要成分是磷脂雙分子和攜帶的膜性分子,其界定依據(jù)形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)及提取方式不同細(xì)胞源的exosome是不同的,這些不同的理化性質(zhì)有利于exosome的提取。從體外培養(yǎng)的細(xì)胞中分離和提取exosome的主要方法是高速離心法,這種方法能分離出大的碎片和已經(jīng)死亡細(xì)胞,然后再通過超速離心法分離提取exosome比較后利用糖梯度,使脂質(zhì)囊性質(zhì)的exosome漂浮于上面。具體來說,Exosome的研究方式是分離/捕獲小囊泡,并拷問它所攜帶的貨物。就目前而言,人們多采用超速離心、磁珠免疫捕獲、沉淀或過濾的方法,對exosome進(jìn)行前期的分離。高校做外泌體粒徑分析

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