或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射。4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期)后進行成像分析。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。D-熒光素鉀鹽長期保存條件是-20℃干燥避光。血液熒光劑
可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍光。與螢火蟲螢光素酶類似,海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12535)提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物,輔因子和物理特性:近幾十年來,腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術(shù)得到了很大的發(fā)展,已經(jīng)在細胞增殖、細胞毒性和生物量計數(shù)等方面廣泛應(yīng)用。南通D-熒光素鉀鹽活題成像原理光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。
海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分。熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素等物質(zhì)氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中,不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,除了螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase)之外,還有發(fā)光細菌體內(nèi)的細菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等。目前,人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應(yīng)用***。一則關(guān)于手機上的細菌的新聞里,**在用ATP熒光檢測儀檢測手機表面的細菌。ATP是一種在動物、植物和細菌等活細胞中都存在的能量物質(zhì),由前述的反應(yīng)式可知,ATP與熒光素、熒光素酶反應(yīng)發(fā)出熒光。檢測樣品中的微生物越多,ATP就越多,熒光反應(yīng)的光亮就越大。
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內(nèi)。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常常可以進一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。D-熒光素鉀鹽的配置是什么?
經(jīng)HE染色后觀察細胞的病理形態(tài)學(xué)?;铑}動物成像技術(shù)是近期發(fā)展起來的一種新型穩(wěn)定可靠,是檢測動物體內(nèi)分子及細胞事件的影像檢測技術(shù),強有力手段。利用生物發(fā)光成像(BLI)可以對活題病灶的大小進行無損傷直觀準確檢測。我們有自己的獨自有機合成實驗室,可以生產(chǎn)合成各種化學(xué)發(fā)光試劑,我們可以提供化學(xué)發(fā)光試劑、化學(xué)發(fā)光底物、發(fā)光標記物、發(fā)光增強劑、染料探針類、微生物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。相關(guān)列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(環(huán)已胺)鹽PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學(xué)發(fā)光分析試劑及標記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE。做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司?徐州ATPD-熒光素鉀鹽使用說明
南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。血液熒光劑
8.取剩余裂解液測定LacZ的活性,其讀數(shù)作為內(nèi)標用以矯正熒光素酶的讀數(shù)。9.用矯正后的讀數(shù)作圖,分析數(shù)據(jù)。注:熒光素見光易氧化,已稀釋未用的熒光素應(yīng)丟棄。注意事項:1.熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預(yù)平衡后再進行反應(yīng),而后依據(jù)具體條件進行自動或手動檢測。當用液閃計數(shù)儀時,加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻。2.如果細胞裂解后不能立即對提取物進行檢測,樣品可以在冰上保存大約5h,在-70℃可保存數(shù)月。不要反復(fù)凍融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法檢測冷的樣品時,其信號強度將下降5-15%。4.在熒光素酶活性較高的情況下,導(dǎo)致信號超出線性范圍(信號溢出)可用裂解液將樣品進行稀釋。5.不要儲存稀釋過的樣品。如果必須保存,要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為,這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性。6.一些熒光儀在進行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定,因此建議在開機后過一段時間再進行檢測操作。熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途?a.啟動子結(jié)構(gòu)分析,將啟動子區(qū)域序列(通常2k左右)進行分段截短,或?qū)μ囟ㄎ稽c進行突變,再分別構(gòu)建入luciferase報告載體,檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析,一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性。血液熒光劑
南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求。公司自創(chuàng)立以來,投身于外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉(zhuǎn)染試劑,是商務(wù)服務(wù)的主力軍。翌科生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺,以應(yīng)用為重點,以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物創(chuàng)始人金芳芳,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠為客戶提供良好的服務(wù)。