熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低，因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內的熒光素酶。在相應化學反應中，熒光的產生是來自于螢光素的氧化，有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。沒有熒光素酶的情況下，螢光素與氧氣反應的速率非常慢，而鈣離子的存在常常可以進一步加速反應（與肌肉收縮的情況相似）。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步：螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸（luciferyladenylate）+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈，只有越10%的能量被轉化為光，剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子，而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱，雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。無錫熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽試劑
海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速，靈敏的方法，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性，與海腎螢光素酶相互作用后，該試劑產生具有強光的產物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點：該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分。熒光素酶是生物體內催化熒光素等物質氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中，不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶，除了螢火蟲熒光素酶（FireflyLuciferase）之外，還有發(fā)光細菌體內的細菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等。目前，人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應用***。一則關于手機上的細菌的新聞里，**在用ATP熒光檢測儀檢測手機表面的細菌。ATP是一種在動物、植物和細菌等活細胞中都存在的能量物質，由前述的反應式可知，ATP與熒光素、熒光素酶反應發(fā)出熒光。檢測樣品中的微生物越多，ATP就越多，熒光反應的光亮就越大。常州專業(yè)做D-熒光素鉀鹽活題成像D-熒光素鉀鹽測試比較好的公司有哪幾個？
并實現了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展，現在已經實現了“加樣-讀數”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標，這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力，尤其是在高通量應用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外，還可以檢測底物（luciferin）濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產生反應的保護基團偶聯(lián)，能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數”檢測，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立，一種改進的luciferin面世，能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin，是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經驗，研究人員從蝦的螢光素酶改造設計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶。
請穿實驗服并戴一次性手套操作。8）本產品只作科研用途！D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下，D-熒光素鉀被氧化，產生藍綠色的光(560nm)，當底物過量時，產生的Chemicalbook光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動物細胞的常用報告基因。由于沒有背景干擾，因此可以很容易地檢測出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物，如螢火蟲。在ATP存在下，螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光?；瘜W研究中可用于熒光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司。
注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號115144-35-9為準。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。4）為避免反復凍融，本產品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5）對于檢測靈敏度要求特別高的實驗，建議使用新鮮配制的本產品。6）在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時，應使用無鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響，從而影響檢測。7）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。8）本產品只作科研用途！D-熒光素鉀鹽的配置是什么？熒光 劑
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可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點：①非放射性；②比CAT及其他報告基因速度快；③比CAT靈敏100倍；④熒光素酶在哺乳細胞中的半衰期為3小時，在植物中的半衰期為3．5小時。由于半衰期短，故啟動子的改變會即時導致熒光素酶活性的改變，而熒光素酶不會積累。相反，CAT在哺乳細胞中的半衰期為50小時。熒光素酶濃度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范圍內，熒光信號強度與酶濃度成正比。在理想條件下，可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶。檢測步驟：1．用生物信息學方法分析并預測啟動子區(qū)可能的轉錄因子結合位點。2．設計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段，將此片段插入到熒光素酶報告基因質粒（pGL3-basic）中。3．篩選陽性克隆，測序。擴增克隆并提純質粒備用。4．擴增轉錄因子質粒，提純備用。同時準備相應的空載質粒對照，提純備用。5．培養(yǎng)293（或其它目的細胞），并接種于24孔板中，生長10-24小時（80%匯合度）。6．將報告基因質粒與轉錄因子表達質粒共轉染細胞。7．提取蛋白并用于熒光素酶檢測。8．加入底物，測定熒光素酶的活性。9．計算相對熒光強度，并與空載對照比較。無錫熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽試劑
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