注意事項(xiàng)1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲(chóng)熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn)。2)注射方式、動(dòng)物類(lèi)型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測(cè)時(shí)間。3)如果要進(jìn)行ATP的檢測(cè),盡量避免外源ATP的污染,如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無(wú)菌水。4)為避免反復(fù)凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊4妗?)對(duì)于檢測(cè)靈敏度要求特別高的實(shí)驗(yàn),建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時(shí),應(yīng)使用無(wú)鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會(huì)抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會(huì)對(duì)熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測(cè)。7)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途!光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。連云港熒光素D-熒光素鉀鹽公司
更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲(chóng),而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類(lèi)臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲(chóng)中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲(chóng),含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲(chóng)有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲(chóng)、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng))則有更多,因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)(Photinuspyralis)。免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素,當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí),在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見(jiàn)發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位,檢測(cè)出抗原或抗體。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluoreceinisothiocyante,F(xiàn)ITC),為黃色、橙黃色或褐黃色結(jié)晶粉末,有兩種異構(gòu)體,易溶于水和酒精等溶劑。分子量為389,更大吸收光譜為490~495,更大發(fā)射光譜為520~530urn,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,是更常用的標(biāo)記抗體的熒光素。②四甲基異氰酸羅達(dá)明。水楊基熒光酮D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域?
螢火蟲(chóng)熒光素酶(Luciferase)是一種常用的信號(hào)分子,可以用來(lái)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞.一.細(xì)胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報(bào)告基因的真核表達(dá)重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,利用G418篩選,獲得穩(wěn)染人乳腺哎細(xì)胞株MCF-7-luc,并在穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的細(xì)胞克隆MCF-7體外評(píng)價(jià)其發(fā)光能力。通過(guò)建立裸鼠移植瘤模型,利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測(cè)腫大的瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移情況,為下一步監(jiān)測(cè)裸鼠移植瘤對(duì)藥物作用的變化情從而為分析藥物對(duì)腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定:37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml設(shè)置6個(gè)濃度梯度。在細(xì)胞接種24h后,加入6孔板中,每個(gè)濃度設(shè)2個(gè)孔在10~14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,死亡更低的G418濃度,即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF-7細(xì)胞的濃度。1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞,將細(xì)胞接種于6孔板內(nèi)待細(xì)胞融合度達(dá)到80%~90%孔培養(yǎng)板中,TM即可轉(zhuǎn)染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進(jìn)行轉(zhuǎn)染。在250μl無(wú)血清、無(wú)雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無(wú)血清、無(wú)雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,室溫培育5min。將上述2種稀釋液混勻。
tetrametrylrhodarnineisothiocyante,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,是羅達(dá)明(rhodamine)的衍生物。更大吸收光譜550urn,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對(duì)比鮮明,常用于雙標(biāo)記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種。1.直接法用熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,洗去未結(jié)合的抗體,再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。3.補(bǔ)體法用特異性的抗體和補(bǔ)體的混合液與標(biāo)本上的抗原反應(yīng),補(bǔ)體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補(bǔ)體的熒光抗體與之相結(jié)合,就形成了抗原一抗體一補(bǔ)體一抗補(bǔ)體熒光抗體的復(fù)合物。熒光顯微鏡下所見(jiàn)到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補(bǔ)體法具有敏感性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì),同時(shí)適用于各種不同種屬來(lái)源的特異性抗體的標(biāo)記顯示,在各種不同種屬動(dòng)物抗體的檢測(cè)上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。D-熒光素鉀鹽的合作平臺(tái)有哪些?
從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的***功效等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來(lái)指示能量或生命體征。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級(jí)純()應(yīng)用:1)活細(xì)胞、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達(dá)的成像分析;2)***用于報(bào)告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測(cè)分析;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測(cè)1)配制成100mM的儲(chǔ)存液(200×,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液,配制工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無(wú)殘留。4)圖像分析前立即向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析(或者細(xì)胞放在37℃短時(shí)間孵育后檢測(cè)可增強(qiáng)信號(hào))。D-熒光素鉀鹽注:螢光素、螢光素酶、螢火蟲(chóng)螢光素酶、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲(chóng)熒光素酶、熒光素鉀鹽、熒光素鈉鹽。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素鉀鹽測(cè)試需要哪些必備條件?水楊基熒光酮
D-熒光素也常用于身體的外部研究。連云港熒光素D-熒光素鉀鹽公司
而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲(chóng)有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲(chóng)、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng))則有更多,因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)(Photinuspyralis)。熒光素酶報(bào)告基因(Luc)是指以熒光素(luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的過(guò)程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類(lèi)酶,哺乳細(xì)胞無(wú)內(nèi)源性熒光素酶。更常用的熒光素酶有細(xì)菌熒光素酶、螢火蟲(chóng)熒光素酶和Renilla熒光素酶。細(xì)菌熒光素酶對(duì)熱敏感,因此在哺乳細(xì)胞的應(yīng)用中受到限制。螢火蟲(chóng)熒光素酶靈敏度高,檢測(cè)線性范圍寬達(dá)7~8個(gè)數(shù)量級(jí),是更常用于哺乳細(xì)胞的報(bào)道基因,用熒光比色計(jì)即可檢測(cè)酶活性,因而適用于高通量篩選。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲(chóng)熒光素酶的應(yīng)用,無(wú)需裂解細(xì)胞即可檢測(cè)酶活性。Renilla熒光素酶催化腸腔(coelenterazine)氧化,產(chǎn)物可透過(guò)生物膜,可能是更適用于活細(xì)胞的報(bào)告分子。將熒光素酶報(bào)告基因載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。連云港熒光素D-熒光素鉀鹽公司
南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái)。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫(kù)、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子、細(xì)胞、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售為一體的專業(yè)化公司。翌科生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測(cè)試劑,轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物不斷開(kāi)拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺(tái),以應(yīng)用為重點(diǎn),以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價(jià)值,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時(shí)代,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信。