淮安D-熒光素鉀鹽使用說明

來源: 發(fā)布時間:2022-06-02

    4)待圖像分析前,向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.活ti成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射,以小鼠為例,每只小鼠體重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期)后進行成像分析。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號115144-35-9為準。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。4)為避免反復凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。南京D-熒光素鉀鹽測試公司哪家便宜。淮安D-熒光素鉀鹽使用說明

    常見的熒光素酶有兩種,分別是螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase,編碼基因是luc)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase,編碼基因是Rluc),前者的底物是D-Luciferin,后者的底物是Coelenterazine。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,底物被氧化發(fā)光(不同底物光的顏色和波長不同),當?shù)孜镞^量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。***成像技術(shù)(opticalinvivoimaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù),生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化學發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng),利用光學系統(tǒng)檢測光強度,間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域常用的有**或疾病動物模型的建立,并可用于病毒學研究、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。以下主要介紹D-Luciferin(D熒光素)的分類:D-Luciferin:有三種,分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素?;窗睤-熒光素鉀鹽使用說明D-熒光素鉀鹽測試比較好的公司有哪幾個?

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    可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用,將該序列(通常為啟動子區(qū)域)插入報告基因載體,同時在實驗細胞***轉(zhuǎn)過表達該轉(zhuǎn)錄因子,可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否***,將該信號通路的下游響應(yīng)原件序列構(gòu)建入報告基因載體,在不同上游信號條件下,熒光素酶活性**了通路的下游響應(yīng)。例如在GPCR研究中,將cAMPresponseelement(CRE)載入報告基因載體,構(gòu)建穩(wěn)定表達細胞株后,可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如,將HIF1α的響應(yīng)原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株,可以用于低氧相關(guān)通路的研究。e.驗證microRNA的靶序列,將待測的3’UTR序列插入報告基因載體,再共轉(zhuǎn)入該microRNA,如果熒光素酶活性下降,則提示為其靶序列。Q:在[信諾金達]做熒光素酶報告基因檢測,需要提供什么?實驗結(jié)果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供詳細的轉(zhuǎn)錄因子、目的基因或microRNA信息;2.實驗細胞,[信諾金達]默認為使用293T細胞,實驗結(jié)束后,[信諾金達]會為您提供實驗流程及完整報告一份,包括實驗原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結(jié)果等。做D-熒光素鉀鹽測試哪個公司好?

    酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級:BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(oC):3205.沸點(oC,常壓):未確定6.沸點(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強的綠色熒光,水溶性好。D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光。南通螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽公司

D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些?淮安D-熒光素鉀鹽使用說明

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