鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽試劑

來源: 發(fā)布時間:2022-06-03

    附錄ⅧB),與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液制成的對照液比較,不得更濃()。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過%(附錄ⅧL)。鋅鹽取本品,加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后,加稀鹽酸2ml,搖勻,濾過,濾液中加亞鐵**鉀試液1ml,不得發(fā)生渾濁。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,點于濾紙上,即生成黃色斑點,趁濕置溴蒸氣中,1分鐘后再使與氨蒸氣接觸,斑點即變?yōu)樯罘奂t色。(2)本品的水溶液顯強(qiáng)烈的熒光,用大量的水稀釋后仍極明顯;但加酸使成酸性后,熒光即消失;再加堿使成堿性,熒光又顯出。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)(附錄Ⅲ)。6含量測定編輯取本品約,精密稱定,加水20ml溶解后,加稀鹽酸5ml使熒光素析出,用丁醇-氯仿(1:1)提取4次,每次20ml,合并提取液,用水10ml洗滌,洗液再用異丁醇-氯仿(1:1)5ml振搖提取,合并提取液,置105℃恒重的容器中,在水浴上通風(fēng)蒸發(fā)至干,殘渣用乙醇10ml溶解后,再置水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,精密稱定,殘渣重量與相乘,即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量。熒光素鈉是一種有機(jī)化合物,分子式為C20H10Na2O5,橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光。ATP作用下的D-熒光素鉀鹽什么樣。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽試劑

    熒光素鈉[1],橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)?;拘畔⑺幤访Q熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來源(分子式)與標(biāo)準(zhǔn)本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計算,含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學(xué)性質(zhì)編輯中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱:FluoresceindisodiumsaltCAS號:518-47-8[2]熒光素鈉分子式:C20H10Na2O5分子量:等級:BSMDL號:MFCD00167039Beilstein號:3833041EC號:208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末;無臭,幾乎無味;有引濕性。本品在水中易溶,在乙醇中略溶。橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。4檢查資料編輯氯化物取本品,分取溶液10ml,依法檢查(附錄ⅧA),與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液制成的對照液比較,不得更濃()。硫酸鹽取上述氯化物項下剩余的溶液25ml,依法檢查。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽試劑D-熒光素鉀鹽一般都是使用什么技術(shù)。

    而是對于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的螢光素酶,能夠催化同一螢光素底物,而發(fā)出不同顏色的螢光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的螢光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。如今研究得**透徹的螢光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。[1]螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,可以對整個動物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析:將不同類型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表達(dá))螢光素酶。

    可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達(dá)。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點:①非放射性;②比CAT及其他報告基因速度快;③比CAT靈敏100倍;④熒光素酶在哺乳細(xì)胞中的半衰期為3小時,在植物中的半衰期為3.5小時。由于半衰期短,故啟動子的改變會即時導(dǎo)致熒光素酶活性的改變,而熒光素酶不會積累。相反,CAT在哺乳細(xì)胞中的半衰期為50小時。熒光素酶濃度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范圍內(nèi),熒光信號強(qiáng)度與酶濃度成正比。在理想條件下,可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶。檢測步驟:1.用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測啟動子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。2.設(shè)計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段,將此片段插入到熒光素酶報告基因質(zhì)粒(pGL3-basic)中。3.篩選陽性克隆,測序。擴(kuò)增克隆并提純質(zhì)粒備用。4.?dāng)U增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒,提純備用。同時準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對照,提純備用。5.培養(yǎng)293(或其它目的細(xì)胞),并接種于24孔板中,生長10-24小時(80%匯合度)。6.將報告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。7.提取蛋白并用于熒光素酶檢測。8.加入底物,測定熒光素酶的活性。9.計算相對熒光強(qiáng)度,并與空載對照比較。D-熒光素鉀鹽測試需要滿足哪些條件?

    產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,構(gòu)建原位**模型,之后注入熒光素底物,通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強(qiáng)度變化,從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評價等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征。注:在抗**藥物藥效評價試驗中,由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定**大小,受**生長所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,生物自發(fā)光并不能很***的評價**生長,在抗**藥效評價有較高要求的實驗中,建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測**生長。D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO。 D-熒光素有時候也叫游離酸。鹽城熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽生物公司

D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種?鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽試劑

    可用于需要低檢測限的測定具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速,簡單且均一的生物發(fā)光測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基的使用兼容高斯熒光素酶近年來,其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,因為這些報告基因較小,并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),可通過氧氣催化腔腸素氧化,產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動物細(xì)胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,產(chǎn)***光產(chǎn)物,該發(fā)光產(chǎn)物提供強(qiáng)發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點:提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍(lán)光。與螢火蟲螢光素酶類似。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽試劑

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