淮安熒光素酶D-熒光素鉀鹽公司

來源: 發(fā)布時間:2022-06-23

    包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO;后者能夠易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.活題成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。3)腹腔注射(.)。D-熒光素鉀鹽使用的注意事項?;窗矡晒馑孛窪-熒光素鉀鹽公司

    tetrametrylrhodarnineisothiocyante,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,是羅達明(rhodamine)的衍生物。更大吸收光譜550urn,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對比鮮明,常用于雙標記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種。1.直接法用熒光素標記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,洗去未結(jié)合的抗體,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。3.補體法用特異性的抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應(yīng),補體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補體的熒光抗體與之相結(jié)合,就形成了抗原一抗體一補體一抗補體熒光抗體的復(fù)合物。熒光顯微鏡下所見到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補體法具有敏感性強的優(yōu)勢,同時適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標記顯示,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。南通專業(yè)做D-熒光素鉀鹽活題成像做D-熒光素鉀鹽的哪家便宜。

    常見的熒光素酶有兩種,分別是螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase,編碼基因是luc)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase,編碼基因是Rluc),前者的底物是D-Luciferin,后者的底物是Coelenterazine。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,底物被氧化發(fā)光(不同底物光的顏色和波長不同),當(dāng)?shù)孜镞^量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。***成像技術(shù)(opticalinvivoimaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù),生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化學(xué)發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng),利用光學(xué)系統(tǒng)檢測光強度,間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域常用的有**或疾病動物模型的建立,并可用于病毒學(xué)研究、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。以下主要介紹D-Luciferin(D熒光素)的分類:D-Luciferin:有三種,分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素。

    故根據(jù)熒光反應(yīng)的情況可以檢測樣品中的微生物含量。APT熒光檢測儀***用于食品、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測。1970年,科學(xué)家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu);1985年,科學(xué)家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,并在大腸桿菌中表達,從而得到了具有活性的熒光素酶;1986年,科學(xué)家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列。隨后,各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,熒光素酶的研究和應(yīng)用不斷發(fā)展。目前,熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)等許多領(lǐng)域。以醫(yī)學(xué)領(lǐng)域為例,**們將熒光素酶基因嵌入到*細胞中,再注入熒光素,使*細胞發(fā)光,通過探測熒光,就能監(jiān)測*細胞的擴散和轉(zhuǎn)移。同理,用這種方法能對致病基因、***免疫機制等進行研究,對某些疾病進行診斷,監(jiān)測疫苗、藥物和治療方法的效力。D-熒光素鉀鹽長期保存是有效期一年。

    8.取剩余裂解液測定LacZ的活性,其讀數(shù)作為內(nèi)標用以矯正熒光素酶的讀數(shù)。9.用矯正后的讀數(shù)作圖,分析數(shù)據(jù)。注:熒光素見光易氧化,已稀釋未用的熒光素應(yīng)丟棄。注意事項:1.熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預(yù)平衡后再進行反應(yīng),而后依據(jù)具體條件進行自動或手動檢測。當(dāng)用液閃計數(shù)儀時,加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻。2.如果細胞裂解后不能立即對提取物進行檢測,樣品可以在冰上保存大約5h,在-70℃可保存數(shù)月。不要反復(fù)凍融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法檢測冷的樣品時,其信號強度將下降5-15%。4.在熒光素酶活性較高的情況下,導(dǎo)致信號超出線性范圍(信號溢出)可用裂解液將樣品進行稀釋。5.不要儲存稀釋過的樣品。如果必須保存,要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為,這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性。6.一些熒光儀在進行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定,因此建議在開機后過一段時間再進行檢測操作。熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途?a.啟動子結(jié)構(gòu)分析,將啟動子區(qū)域序列(通常2k左右)進行分段截短,或?qū)μ囟ㄎ稽c進行突變,再分別構(gòu)建入luciferase報告載體,檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析,一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性。D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些?熒光基團

南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜?;窗矡晒馑孛窪-熒光素鉀鹽公司

    并實現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標,這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,尤其是在高通量應(yīng)用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應(yīng)測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,還可以檢測底物(luciferin)濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護基團偶聯(lián),能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團隊的建立,一種改進的luciferin面世,能更好地用于典型的報告基因檢測應(yīng)用。這種新的底物——fluoroluciferin,是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因,即NanoLuc?螢光素酶?;窗矡晒馑孛窪-熒光素鉀鹽公司

南京翌科生物科技有限公司總部位于仙林街道緯地路9號江蘇生命科技園F7棟301-3室,是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子、細胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司。翌科生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺,以應(yīng)用為重點,以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物創(chuàng)始人金芳芳,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠為客戶提供良好的服務(wù)。