與DNA相比,RNA種類繁多,分子量較小,含量變化大。RNA可根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA。非編碼大RNA包括核糖體RNA、長鏈非編碼RNA。非編碼小RNA包括轉(zhuǎn)移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA(20~300nt)包括miRNA、SiRNA、piRNA、scRNA、snRNA、snoRNA等,細菌也有小分子RNA(50~500nt)。[2]不同類型的RNA的功能和分布名稱功能存在信使RNA(mRNA)翻譯模板。所有的生物轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)攜帶氨基酸,參與翻譯。所有的生物核糖體RNA(rRNA)核糖體組分,參與翻譯。所有的生物核小RNA(snRNA)參與真核細胞核mRNA前體的剪接。真核生物核仁小RNA(snoRNA)參與古菌和真核生物rRNA前體的后加工。真核生物和古菌微RNA(microRNA或miRNA)主要在翻譯水平上抑制特定基因的表達。絕大多數(shù)真核生物增強子RNA(eRNA)在真核生物的增強子區(qū)域轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的一類非編碼RNA,其功能是對附近的基因表達進行調(diào)控。真核生物小干擾RNA(siRNA)主要在翻譯水平上抑制特定基因的表達。 普陀區(qū)做RNA測試哪家便宜?南京RNA
2)在30-50%細胞匯合度時進行轉(zhuǎn)染,通?;虺聊治鲋辽?4-72h進行。低密度轉(zhuǎn)染細胞可使細胞轉(zhuǎn)染和分析間隔更長,從而使由于細胞過度生長造成的細胞活性過度損壞降到更低。根據(jù)靶基因的特性,高密度轉(zhuǎn)染的細胞可能更加適合條件的優(yōu)惠。3)不要在轉(zhuǎn)染時的培養(yǎng)基中加入***,因為這將會將降低細胞轉(zhuǎn)染的效率和導(dǎo)致細胞死亡。4)為了獲得更好的結(jié)果,可以使用invitrogen的Opti-MEM低血清培養(yǎng)基在形成復(fù)合物前稀釋lipofectamineTM2000和siRNA。可以使用熒光標(biāo)記的siRNA幫助優(yōu)化細胞系的轉(zhuǎn)染條件。一旦確定了用來轉(zhuǎn)染的更佳條件,可以在每一次實驗都包括熒光標(biāo)記siRNA,作為轉(zhuǎn)染效率的指示劑。本產(chǎn)品只供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床***、食品及化妝品等用途2.轉(zhuǎn)染步驟以lipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染siRNA于24孔板,轉(zhuǎn)染濃度為50nM為例,其他規(guī)格容器轉(zhuǎn)染見表2。1)接種細胞:貼壁細胞:轉(zhuǎn)染前24h,在400ul無***培養(yǎng)基中接種個細胞,轉(zhuǎn)染時細胞融合度為30-50%。(注:鋪板時要將細胞消化完全混勻,避免細胞堆積生長。)懸浮細胞:轉(zhuǎn)染前24h,在400ul無***培養(yǎng)基中接種個細胞,轉(zhuǎn)染時細胞數(shù)量4-8X105/孔。2)轉(zhuǎn)染步驟:A.用50ulOpti-MEM稀釋siRNA(轉(zhuǎn)染細胞的終濃度為50nM)。連云港miRNA一步法熒光定量PCR試劑盒浙江做RNA測試哪家便宜?
200)4050細菌RNA小量提取試劑盒:從正處于指數(shù)生長期的細菌培養(yǎng)物中提取RNAR6950-00BacterialRNAKit(5)150R6950-01BacterialRNAKit(50)1260R6950-02BacterialRNAKit(200)4050土壤RNA提取試劑盒:從2g土壤樣品中提取高質(zhì)量的RNAR6825-00SoilRNAKit(5)360R6825-01SoilRNAKit(50)3040R6825-02SoilRNAKit(200)10880糞便RNA提取試劑盒:從05g糞便樣品中提取高質(zhì)量的RNAR6828-00StoolRNAKit(5)360R6828-01StoolRNAKit(50)3040R6828-02StoolRNAKit(200)10080病毒RNA提取試劑盒:從血液、尿液、分泌液和其它無細胞體液中純化RNAR6874-00RNAKit(5)130R6874-01RNAKit(50)990R6874-02RNAKit(200)3480總RNA提取試劑盒II:從1X107個真核細胞,100mg動物/植物組織中提取100ug總RNAR6934-00TotalRNAKitII(5)150R6934-01TotalRNAKitII(50)900R6934-02TotalRNAKitII(200)3500總RNA中量提取試劑盒II:從1X108個細胞或200mg組織中提取高達1mg總RNAR6754-00Ultra-PureTotalRNAMidiKitII(2)240R6754-01Ultra-PureTotalRNAMidiKitII(10)650R6754-02Ultra-PureTotalRNAMidiKitII。
輕輕吹3-5次混勻。B.輕輕混勻轉(zhuǎn)染試劑,用50ulOpti-MEM稀釋lipofectamineTM2000,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置5min。C.混合轉(zhuǎn)染試劑和siRNA稀釋液,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置20min。D.轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入到24孔細胞板中,100ul/孔,前后輕搖細胞板混合均勻。E.細胞板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48h。轉(zhuǎn)染4-6h后可更換新鮮培養(yǎng)基。3)效果檢測:轉(zhuǎn)染完成后24-72h均可進行siRNA沉默效果檢測,更佳檢測時間與細胞類型,轉(zhuǎn)染試劑,檢測目的等相關(guān)。1)RNA水平的檢測:mRNA是檢測siRNA沉默效率的更佳指標(biāo),siRNA轉(zhuǎn)染后24-72h即可檢測到靶基因mRNA表達明顯降低,檢測方法是RealtimePCR。2)蛋白水平的檢測:檢測方法是Westernblot。3)功能篩選:應(yīng)用EdU細胞增殖、EdUTP細胞凋亡等方法進行細胞功能篩選。動物實驗修飾方法:由于動物實驗對siRNA穩(wěn)定性的要求較高,盡管未修飾的siRNA也可以進行動物實驗,但是以CHol,OMe,PS修飾的siRNA效果較好。給***法:局部給藥:更直接的導(dǎo)入方式,siRNA的導(dǎo)入效率高,用量少。siRNA能很快被吸收。適用于淺表***和組織,包括眼,肌肉和皮下組織等。2表2:使用lipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染siRNA產(chǎn)品參考用量細胞培養(yǎng)容器表面積。南京雨花臺區(qū)RNA哪家便宜?
組織RNA提取試劑盒產(chǎn)品介紹:專為高通量細胞篩選用RNA提取設(shè)計,采用高性能納米級超順磁磁性微球,可在1小時內(nèi)獲得高純度總RNA。RNA產(chǎn)物適用于RT-PCR、RNA-seq、芯片分析、分子克隆等實驗。已為FireAuto32、96高通量全自動核酸提取儀優(yōu)化,同時適用于市場大部分主流自動化核酸提取儀及移液工作站。組織RNA提取試劑盒產(chǎn)品特性:※適配高通量自動化核酸提取儀,更少人工操作時間※樣本制備時間短,樣品前處理需10min,全自動核酸提取儀50min※樣本間差異低,結(jié)果重復(fù)性強※純度高,無DNA污染※適用于多種樣本類型提取流程:組織研磨/勻漿--96深孔板、預(yù)裝試劑--結(jié)合--洗滌1--DNase處理--洗滌1、2、3--洗脫南京翌科生物科技有限公司公司搭建了國際水平的新一代測序技術(shù)診斷試劑研發(fā)平臺,可為新一代測序技術(shù)體系(二代測序、Nanopore四代測序、數(shù)字PCR等)提供樣本獲取、保存、提取、建庫、靶向捕獲全系工具產(chǎn)品,逐步實現(xiàn)*進口試劑替代,并在國際市場占有一定市場份額,打破該領(lǐng)域技術(shù)長期受制于國外的局面。公司已完成多輪融資,成為**重點支持的國際精細醫(yī)療品牌。技術(shù)發(fā)展、服務(wù)成就事業(yè)。公司倡導(dǎo)與時代主流同步的企業(yè)文化和人文精神,堅持有競爭力的人力資源政策。RNA如何選擇合作公司?上海RNA
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25)植物RNA大量提取試劑盒:從小于5g新鮮或冷藏的植物組織中提取高達2mg總RNAR6629-01PlantRNAMaxiKit(5)R6629-02PlantRNAMaxiKit(20)真的菌群RNA小量提取試劑盒:從小于100mg真的菌群組織或真的菌群細胞中提取總RNAR6840-00FungalRNAKit(5)R6840-01FungalRNAKit(50)R6840-02FungalRNAKit(200)酵母RNA小量提取試劑盒:從6X107個酵母細胞中純化RNAR6870-00YeastRNAKit(5)R6870-01YeastRNAKit(50)R6870-02YeastRNAKit(200)細菌RNA小量提取試劑盒:從正處于指數(shù)生長期的細菌培養(yǎng)物中提取RNAR6950-00BacterialRNAKit(5)R6950-01BacterialRNAKit(50)R6950-02BacterialRNAKit(200)土壤RNA提取試劑盒:R6825-00SoilRNAKit(5)R6825-01SoilRNAKit(50)R6825-02SoilRNAKit(200)糞便RNA提取試劑盒R6828-00StoolRNAKit(5)R6828-01StoolRNAKit(50)R6828-02StoolRNAKit(200)病毒RNA提取試劑盒:從血液、尿液、分泌液和其它無細胞體液中純化RNAR6874-00(5)R6874-01(50)R6874-02(200)總RNA提取試劑盒:從1X107個真核細胞,100mg動物/植物組織中提取100ug總RNAR6934-00TotalRNAKitII(5)R6934-01TotalRNAKitII(50)R6934-02TotalRNAKitII。南京RNA