熒光二抗?jié)舛?/h1>
來源: 發(fā)布時間:2022-07-02

    后者能夠易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內實驗。配成溶液后的這三種產品,在絕大多數的應用上都沒有實質性的差別。產品性質運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射,以小鼠為例,每只小鼠體重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入體內10-15min(待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期)后進行成像分析。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。 南京地區(qū)有哪些做D-熒光素鉀鹽測試的公司。熒光二抗?jié)舛?/p>

    SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應用:1)體外化學發(fā)光分析(invitro);2)***成像實驗(invivo);3)高靈敏度ATP分析;步驟:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,配制成100mM的儲存液(200×,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用無菌的PBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應用于整個生物技術領域,尤其是體內***成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光(見下圖)。當熒光素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質粒轉染入細胞后,導入研究動物如大、小鼠體內,之后注入熒光素,通過生物發(fā)光成像技術(BLI)來檢測光強度變化。熒光二抗?jié)舛茸鯠-熒光素鉀鹽的哪家便宜。

    因此只有在活細胞內才會產生長發(fā)生光現象,并且發(fā)光光強度與標記細胞的數目線性相關。結構與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應,生成氧化熒光素(oxyluciferin),并產生長發(fā)生光現象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內的,約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個小時,只有活細胞才能夠持續(xù)表達熒光素酶。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能。(2)熒光素是280道爾頓的小分子,水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透細胞膜和血腦屏障。(3)熒光素在體內擴散速度快,可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進入動物體內。腹腔注射擴散較慢,持續(xù)發(fā)光長。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達熒光素酶的細胞開始發(fā)光,10min后強度達到穩(wěn)定的更高點,在更高點持續(xù)約20~30min后開始衰減,約3h后熒光素排除,發(fā)光全部消失,更佳檢測時間是在注射后15~35min之間;若進行熒光素靜脈注射,擴散快,但發(fā)光持續(xù)時間很短??蒲腥藛T根據大量的實驗總結出熒光素的合適的用量是150mg/kg,即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制,只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動物體內有一定的代謝過程。

    熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內)甚至沒有毒性,可用于原核和真核細胞。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,可催化熒光素的兩步氧化,在560nm處產生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點:具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司怎么樣?

    重組為一個明亮的螢光素酶。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低,從而可以進行蛋白質相互作用的測定;也可以和HiBiT一樣高,從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究,我們將與LgBiT具有極強親和作用的。HiBiT作為一種易于檢測且具有高靈敏度的蛋白質標簽,具有多種功能,例如當與基于CRIPSR的標簽一起使用時,可以創(chuàng)建內源性報告基因模型。[1]2020Lumit?技術隨著NanoBiT?技術的發(fā)展,人們認識到可以利用該系統(tǒng)通過結合免疫測定的組分檢測多種分析物。由此產生的平臺(現稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測法。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內的熒光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。熒光生成反應通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸。D-熒光素鉀鹽測試需要哪些必備條件?淮安專業(yè)做D-熒光素鉀鹽

南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣?熒光二抗?jié)舛?/p>

    普遍應用于整個生物技術領域,尤其是體內活ti成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光。當熒光素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性。螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現于世。在生物化學和分子生物學的早期,這一現象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,Promega發(fā)布了di一代螢光素酶分析產品,并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術Promega螢光素酶技術發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,Promega初次提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術的應用可能性。當時的人們認為,螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,可能會對分子生物學家的研究產生重要的影響。幾個月后,di一代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,使這項新技術正式并更范圍廣地為全球研究人員服務。熒光二抗?jié)舛?/p>