而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲(chóng)有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲(chóng)、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng))則有更多,因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)(Photinuspyralis)。熒光素酶報(bào)告基因(Luc)是指以熒光素(luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的過(guò)程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類酶,哺乳細(xì)胞無(wú)內(nèi)源性熒光素酶。更常用的熒光素酶有細(xì)菌熒光素酶、螢火蟲(chóng)熒光素酶和Renilla熒光素酶。細(xì)菌熒光素酶對(duì)熱敏感,因此在哺乳細(xì)胞的應(yīng)用中受到限制。螢火蟲(chóng)熒光素酶靈敏度高,檢測(cè)線性范圍寬達(dá)7~8個(gè)數(shù)量級(jí),是更常用于哺乳細(xì)胞的報(bào)道基因,用熒光比色計(jì)即可檢測(cè)酶活性,因而適用于高通量篩選。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲(chóng)熒光素酶的應(yīng)用,無(wú)需裂解細(xì)胞即可檢測(cè)酶活性。Renilla熒光素酶催化腸腔(coelenterazine)氧化,產(chǎn)物可透過(guò)生物膜,可能是更適用于活細(xì)胞的報(bào)告分子。將熒光素酶報(bào)告基因載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。D-熒光素鉀鹽長(zhǎng)期保存是有效期一年?;窗矡晒馑谼-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
在食品衛(wèi)生領(lǐng)域由于ATP生物發(fā)光技術(shù)無(wú)需培養(yǎng)過(guò)程,操作簡(jiǎn)便、靈敏度高,數(shù)分鐘內(nèi)可得到結(jié)果,具有其它微生物檢測(cè)方法無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì),是目前檢測(cè)微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一。在螢火蟲(chóng)和幾種其它甲蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲(chóng)熒光酶/熒光素。通過(guò)中間體dioxetanone介導(dǎo)作用,熒光素酶氧化ATPji活的熒光素。螢火蟲(chóng)熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產(chǎn)生熒光。這個(gè)反應(yīng)發(fā)生的幾秒內(nèi)在560nm處的化學(xué)熒光達(dá)到更高峰,當(dāng)熒光素和ATP都超量存在的條件下,發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關(guān)系。螢火蟲(chóng)熒光素酶很早以前就用于與抗體結(jié)合形成偶聯(lián)物,作為免疫分析中用熒光素作為底物進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)簽。與HRP和堿性磷酸酶相比,熒光素酶不耐化學(xué)修飾。這個(gè)酶的一個(gè)特殊的優(yōu)點(diǎn)是,除了高靈敏度外,在哺乳動(dòng)物組織中內(nèi)源性熒光素酶的活性很低。熒光素酶另一個(gè)重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測(cè)。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測(cè)污染,因?yàn)楫a(chǎn)生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中。這種類型的ATP生物熒光特性足以保證對(duì)食品表面的檢測(cè),無(wú)論是在加工制作工程中設(shè)備的污染還是產(chǎn)品的污染都能檢出。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物。上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽濃度D-熒光素鉀鹽測(cè)試需要哪些必備條件?
熒光素鈉[1],橙紅色粉末,無(wú)氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(zhǎng)(水)?;拘畔⑺幤访Q熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來(lái)源(分子式)與標(biāo)準(zhǔn)本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計(jì)算,含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學(xué)性質(zhì)編輯中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱:FluoresceindisodiumsaltCAS號(hào):518-47-8[2]熒光素鈉分子式:C20H10Na2O5分子量:等級(jí):BSMDL號(hào):MFCD00167039Beilstein號(hào):3833041EC號(hào):208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末;無(wú)臭,幾乎無(wú)味;有引濕性。本品在水中易溶,在乙醇中略溶。橙紅色粉末,無(wú)氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(zhǎng)(水)。4檢查資料編輯氯化物取本品,分取溶液10ml,依法檢查(附錄ⅧA),與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液制成的對(duì)照液比較,不得更濃()。硫酸鹽取上述氯化物項(xiàng)下剩余的溶液25ml,依法檢查。
通過(guò)開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)改變螢火蟲(chóng)螢光素酶檢測(cè)的信號(hào)動(dòng)力學(xué),例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進(jìn)行檢測(cè)。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡(jiǎn)化了樣品處理,并實(shí)現(xiàn)了在非常高通量的應(yīng)用中使用報(bào)告基因檢測(cè)。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,現(xiàn)在已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測(cè)方法。ATP是細(xì)胞健康的重要指標(biāo),這使得CellTiter-Glo?能有效測(cè)定細(xì)胞活力,尤其是在高通量應(yīng)用中。該檢測(cè)原理還促進(jìn)了其它ATP檢測(cè)平臺(tái)的誕生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測(cè)系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測(cè)除了可以利用螢火蟲(chóng)螢光素酶反應(yīng)測(cè)定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,還可以檢測(cè)底物(luciferin)濃度的變化。通過(guò)將luciferin與可被不同酶類識(shí)別并產(chǎn)生反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)偶聯(lián),能對(duì)這些酶進(jìn)行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測(cè),如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測(cè)系統(tǒng)隨著對(duì)螢火蟲(chóng)螢光素酶化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)一步了解以及Promega生物學(xué)家和化學(xué)家團(tuán)隊(duì)的建立,一種改進(jìn)的luciferin面世,能更好地用于典型的報(bào)告基因檢測(cè)應(yīng)用。這種新的底物——fluoroluciferin。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試品牌有哪些?
5)對(duì)于檢測(cè)靈敏度要求特別高的實(shí)驗(yàn),建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時(shí),應(yīng)使用無(wú)鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會(huì)抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會(huì)對(duì)熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測(cè)。7)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途!熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是來(lái)自螢火蟲(chóng)體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時(shí)近年來(lái)研究得較多的來(lái)源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過(guò)程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過(guò)熒光測(cè)定儀設(shè)備測(cè)定luciferin氧化過(guò)程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。螢火蟲(chóng)螢光素酶更通用和更常見(jiàn)的報(bào)告基因是北美螢火蟲(chóng)photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內(nèi))甚至沒(méi)有毒性,可用于原核和真核細(xì)胞。運(yùn)輸和保存運(yùn)輸條件:4℃冰袋運(yùn)輸。D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域?無(wú)錫熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽濃度
D-熒光素鉀鹽使用的注意事項(xiàng)?;窗矡晒馑谼-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
我們將與LgBiT具有極強(qiáng)親和作用的。HiBiT作為一種易于檢測(cè)且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽,具有多種功能,例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時(shí),可以創(chuàng)建內(nèi)源性報(bào)告基因模型。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,人們認(rèn)識(shí)到可以利用該系統(tǒng)通過(guò)結(jié)合免疫測(cè)定的組分檢測(cè)多種分析物。由此產(chǎn)生的平臺(tái)(現(xiàn)稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡(jiǎn)化免疫檢測(cè)法。螢光素酶(英語(yǔ):Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲(chóng)體內(nèi)的螢光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來(lái)自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒(méi)有螢光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似)。螢光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧螢光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對(duì)比的是人類使用的白熾燈,只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi)。螢光素或螢光素酶不是特定的分子?;窗矡晒馑谼-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明