注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號115144-35-9為準(zhǔn)。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。4）為避免反復(fù)凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5）對于檢測靈敏度要求特別高的實驗，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6）在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時，應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響，從而影響檢測。7）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。8）本產(chǎn)品只作科研用途！D-熒光素鉀鹽的激發(fā)波長是多長？泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽
4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min，然后進行圖像分析。2.活ti成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號115144-35-9為準(zhǔn)。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。4）為避免反復(fù)凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。鎮(zhèn)江螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽哪家好D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。
因此只有在活細胞內(nèi)才會產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象，并且發(fā)光光強度與標(biāo)記細胞的數(shù)目線性相關(guān)。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內(nèi)的，約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個小時，只有活細胞才能夠持續(xù)表達熒光素酶。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能。(2)熒光素是280道爾頓的小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透細胞膜和血腦屏障。(3)熒光素在體內(nèi)擴散速度快，可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進入動物體內(nèi)。腹腔注射擴散較慢，持續(xù)發(fā)光長。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達熒光素酶的細胞開始發(fā)光，10min后強度達到穩(wěn)定的更高點，在更高點持續(xù)約20~30min后開始衰減，約3h后熒光素排除，發(fā)光全部消失，更佳檢測時間是在注射后15~35min之間；若進行熒光素靜脈注射，擴散快，但發(fā)光持續(xù)時間很短?？蒲腥藛T根據(jù)大量的實驗總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg，即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制，只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動物體內(nèi)有一定的代謝過程。
螢火蟲熒光素酶（Luciferase）是一種常用的信號分子，可以用來標(biāo)記腫瘤細胞.一．細胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報告基因的真核表達重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7，利用G418篩選，獲得穩(wěn)染人乳腺哎細胞株MCF-7-luc，并在穩(wěn)定表達熒光素酶基因的細胞克隆MCF-7體外評價其發(fā)光能力。通過建立裸鼠移植瘤模型，利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長及轉(zhuǎn)移情況，為下一步監(jiān)測裸鼠移植瘤對藥物作用的變化情從而為分析藥物對腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定：37℃細胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml設(shè)置6個濃度梯度。在細胞接種24h后，加入6孔板中，每個濃度設(shè)2個孔在10～14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細胞生長情況，死亡更低的G418濃度，即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF－7細胞的濃度。1)細胞轉(zhuǎn)染取對數(shù)生長期的MCF－7細胞，將細胞接種于6孔板內(nèi)待細胞融合度達到80%～90%孔培養(yǎng)板中，TM即可轉(zhuǎn)染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進行轉(zhuǎn)染。在250μl無血清、無雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無血清、無雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000，室溫培育5min。將上述2種稀釋液混勻。D-熒光素鉀鹽測試怎么樣？
luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示：，在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，分子結(jié)構(gòu)如右圖所示，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。但是該底物熒光素以前大多依賴進口，產(chǎn)品價格昂貴。而且由于該產(chǎn)品容易降解、受潮影響使用效果。所以，需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn)，一方面可以降低成本，一方面可以增強使用效果。作者：科遠迪鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。D-luciferin，potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光，一般是將Fireflyluciferase基因（由554個氨基酸構(gòu)成，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細胞染色體DNA上以表達熒光素酶，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株，當(dāng)細胞分裂、轉(zhuǎn)移、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達?；?、細胞和活題動物都可被熒光素酶基因標(biāo)記。將標(biāo)記好的細胞接種到實驗動物體內(nèi)后，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin，potassiumsalt，以下均簡稱熒光素)，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。所發(fā)的光波長在540-600nm。這種酶在ATP，氧存在的條件下，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光。做D-熒光素鉀鹽測試品牌有哪些？泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽
D-熒光素鉀鹽的發(fā)射波長是多少？泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽
我們將與LgBiT具有極強親和作用的。HiBiT作為一種易于檢測且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽，具有多種功能，例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時，可以創(chuàng)建內(nèi)源性報告基因模型。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展，人們認(rèn)識到可以利用該系統(tǒng)通過結(jié)合免疫測定的組分檢測多種分析物。由此產(chǎn)生的平臺（現(xiàn)稱為“Lumit”）提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測法。螢光素酶（英語：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中，熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化，有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。沒有螢光素酶的情況下，螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢，而鈣離子的存在常常可以進一步加速反應(yīng)（與肌肉收縮的情況相似）。螢光生成反應(yīng)通常分為以下兩步：螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸（luciferyladenylate）+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧螢光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈，只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光，剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。螢光素或螢光素酶不是特定的分子。泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽