酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(zhǎng)(水)。中文名稱(chēng):熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級(jí):BS物性數(shù)據(jù)編輯播報(bào)1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對(duì)蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(diǎn)(oC):3205.沸點(diǎn)(oC,常壓):未確定6.沸點(diǎn)(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(diǎn)(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點(diǎn)或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對(duì)數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強(qiáng)的綠色熒光,水溶性好。D-熒光素鉀鹽測(cè)試需要哪些必備條件?熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖
熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,可以對(duì)整個(gè)動(dòng)物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析:將不同類(lèi)型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表達(dá))熒光素酶,就可以用高敏感度的CCD相機(jī)進(jìn)行對(duì)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行活ti觀(guān)察而不會(huì)傷害到動(dòng)物本身。在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,如熒光探測(cè)器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測(cè)到。這就使得對(duì)包括影響在內(nèi)的多種生命活動(dòng)進(jìn)程進(jìn)行觀(guān)察成為可能。例如,熒光素酶可以被用于檢測(cè)血庫(kù)中所存血液中的紅血球是否開(kāi)始破裂。法醫(yī)可以用含有熒光素酶的溶液來(lái)檢測(cè)犯罪現(xiàn)場(chǎng)中殘留的血跡。醫(yī)院用熒光素酶的發(fā)光來(lái)發(fā)現(xiàn)特定的疾病。熒光素酶還可以作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,例如,用于在轉(zhuǎn)染過(guò)熒光素酶的細(xì)胞中檢測(cè)特定啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平;這一技術(shù)被稱(chēng)為報(bào)告基因檢測(cè)法或熒光素酶檢測(cè)法(LuciferaseAssay)。熒光素酶是一個(gè)熱敏感蛋白,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過(guò)程中熱休克蛋白的保護(hù)能力。常州D-熒光素鉀鹽活題成像熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。
Q:熒光素酶作為報(bào)告基因相比于熒光蛋白有哪些優(yōu)勢(shì)?Luciferase的靈敏度相比于GFP提高10-100倍以上,同時(shí)具有更寬的動(dòng)態(tài)范圍,便于數(shù)值分析比較,不需要熒光顯微鏡,而且在***實(shí)驗(yàn)中其熒光穿透性高于EGFP等熒光蛋白,同時(shí)由于沒(méi)有內(nèi)源活性、其本底信號(hào)很低。而GFP等熒光蛋白相比于熒光素酶的優(yōu)勢(shì)在于可以進(jìn)行失蹤定位,并且其觀(guān)測(cè)不需裂解細(xì)胞,方便進(jìn)行適時(shí)觀(guān)察。Q:海腎熒光素酶和螢火蟲(chóng)熒光素酶相比,相對(duì)活性如何?在氧、鎂和ATP的存在下,螢火蟲(chóng)熒光素酶作用于甲蟲(chóng)熒光素,而來(lái)源于海洋腔腸(Renillareniformis)的熒光素酶在氧的存在下作用于海腎熒光素。雙報(bào)告基因技術(shù)(Dual-reporterassays),結(jié)合了螢火蟲(chóng)熒光素酶測(cè)試和海腎熒光素酶測(cè)試。Q:雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)轉(zhuǎn)染效率很低而且復(fù)孔重復(fù)不出來(lái)是什么原因?轉(zhuǎn)染效率低的話(huà)可以從三個(gè)方面改善,首先要確保細(xì)胞狀態(tài)是好的,通常我們選出處于分裂期的細(xì)胞,另外陽(yáng)性對(duì)照您可以選擇過(guò)表達(dá)的熒光蛋白質(zhì)粒,還有就是DNA的質(zhì)量尤為重要,更好是先酶切驗(yàn)證。這個(gè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果很靈敏,有一定差異是正常的,通常只要確保它在一個(gè)數(shù)量級(jí)之內(nèi)即可。如果差異超出這個(gè)范圍可以從兩方面改善,一是記住保持樣本的均一性。
tetrametrylrhodarnineisothiocyante,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,是羅達(dá)明(rhodamine)的衍生物。更大吸收光譜550urn,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對(duì)比鮮明,常用于雙標(biāo)記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種。1.直接法用熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,洗去未結(jié)合的抗體,再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。3.補(bǔ)體法用特異性的抗體和補(bǔ)體的混合液與標(biāo)本上的抗原反應(yīng),補(bǔ)體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補(bǔ)體的熒光抗體與之相結(jié)合,就形成了抗原一抗體一補(bǔ)體一抗補(bǔ)體熒光抗體的復(fù)合物。熒光顯微鏡下所見(jiàn)到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補(bǔ)體法具有敏感性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì),同時(shí)適用于各種不同種屬來(lái)源的特異性抗體的標(biāo)記顯示,在各種不同種屬動(dòng)物抗體的檢測(cè)上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱(chēng):Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱(chēng)。D-熒光素鉀鹽測(cè)試怎么樣?
就可以用高敏感度的CCD相機(jī)對(duì)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行***觀(guān)察而不會(huì)傷害到動(dòng)物本身。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,如螢光探測(cè)器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測(cè)到。這就使得對(duì)包括***在內(nèi)的多種生命活動(dòng)進(jìn)程進(jìn)行觀(guān)察成為可能。例如,螢光素酶已經(jīng)被用于商業(yè)化的次世代焦磷酸定序技術(shù),借由dNTP接上DNA鏈時(shí)水解放出的焦磷酸,透過(guò)另外一個(gè)硫酸鹽腺甘酸轉(zhuǎn)移酶反應(yīng),螢光素酶能將產(chǎn)物ATP與螢光素轉(zhuǎn)化為冷光,機(jī)器借此探測(cè)光線(xiàn)并定序。螢光素酶也可以被用于檢測(cè)血庫(kù)中所存血液中的紅血球是否開(kāi)始破裂。法醫(yī)可以用含有螢光素酶的溶液來(lái)檢測(cè)犯罪現(xiàn)場(chǎng)中殘留的血跡。醫(yī)院用螢光素酶的發(fā)光來(lái)發(fā)現(xiàn)特定的疾病。螢光素酶還可以作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,例如,用于在轉(zhuǎn)染過(guò)螢光素酶的細(xì)胞中檢測(cè)特定啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平;這一技術(shù)被稱(chēng)為報(bào)告基因檢測(cè)法或螢光素酶檢測(cè)法(LuciferaseAssay)。螢光素酶是一個(gè)熱敏感蛋白,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過(guò)程中熱休克蛋白的保護(hù)能力。此外,螢光素酶水母素的發(fā)光強(qiáng)度與環(huán)境中鈣離子濃度相關(guān),因此可用于檢測(cè)生物體內(nèi)的鈣。D-熒光素鉀鹽運(yùn)輸條件是4℃冰袋運(yùn)輸。常州D-熒光素鉀鹽活題成像
D-熒光素鉀鹽檢測(cè)公司招代理嗎?熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖
每孔加入100μl養(yǎng)24h后,Luciferin使其終濃度為150μg/ml,PBS,再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測(cè),分析發(fā)光強(qiáng)度與細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性。4)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)繪制MCF7-luc細(xì)胞和作為對(duì)照取表達(dá)熒光素酶的MCF-7細(xì)胞,接種于24孔板,接種密度為2×104/孔。細(xì)胞接種后1~7d,每天胰蛋白酶消化其中3孔細(xì)胞,用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定細(xì)胞數(shù)。以細(xì)胞生長(zhǎng)天數(shù)為橫坐標(biāo),細(xì)胞數(shù)目為縱坐標(biāo),分別繪制兩種細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)。二.動(dòng)物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠,4~5周齡,體重(15±2)g,雌雄各3只。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7用PBS重懸為2.5×10/ml懸液,每只裸鼠左右背側(cè)近腋部皮下接種100μl,共接種6只。接種后第5d采用德國(guó)BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度。以后每5d觀(guān)測(cè)一連續(xù)觀(guān)測(cè)30d。觀(guān)測(cè)前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉(計(jì)量為:35mg/kg體重),按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin(invivograde),10min后,進(jìn)行活題成像觀(guān)察皮下腫大的瘤的生長(zhǎng)情況,定量分析各時(shí)間點(diǎn)的熒光值。繪制腫大的瘤皮下生長(zhǎng)曲線(xiàn).MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學(xué)觀(guān)察MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下接種后25d,脫頸處死小鼠,取腫大的瘤組織,制成石蠟切片,切片厚度為3μm。熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖