蛋白純化試劑Anti-HisAntibody產(chǎn)品介紹:His標簽是一種分子量很小的標簽,通常由6-8個組氨酸(His)組成,His標簽是蛋白純化和檢測的常用標簽之一,由于其分子量小,融合至目的蛋白后對蛋白的結(jié)構(gòu)和特性幾乎沒有影響??笻is標簽的抗體能對His標簽融合蛋白進行準確的檢測、定位和純化,從而為廣大科研者提供便利??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):His標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG1來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融標簽親和純化試劑哪家好?浙江多肽試劑哪里買
金屬螯合親合層析,是一種新型的應(yīng)用于原**白純化的技術(shù)。該方法通過蛋白質(zhì)表面的一些特殊的氨基酸,使之與金屬離子發(fā)生相互作用,從而對蛋白質(zhì)進行親和純化。這些作用包括配價鍵結(jié)合、靜電吸附、共價鍵結(jié)合等,其中以6個組氨酸殘基組合的融合標簽(His-Tag)在原**白表達中的應(yīng)用**為***。His-Tag可結(jié)合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的結(jié)構(gòu),以便于進行下一步的純化及檢測。由于金屬螯合親合層析具有配體簡單、吸附量大、分離條件溫和、通用性強等特點,所以可選擇范圍廣,高鹽,存在變性劑以及去垢劑的上樣條件下進行純化,His-Tag正逐漸成為分離純化蛋白質(zhì)等生物工程產(chǎn)品***的技術(shù)之一。選試劑到楚知湖南定制試劑哪里買更高的抗體結(jié)合能力。
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:HA標簽是人流感血凝素的第98-106氨基酸序列YPYDVPDYA,對外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小,容易構(gòu)建成標簽蛋白融合到蛋白N端或者C端,因此常被用于重組蛋白的融合表達。Anti-HAAntibody能夠特異性識別HA標簽,從而用于融合蛋白的表達和定位檢測。抗體來源:小鼠交叉反應(yīng):HA標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融-上海楚知生物
蛋白純化試劑純化流程5)依次使用3倍柱體積的平衡液和5倍柱體積的去離子水平衡填料,***再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4-30°C保存,防止填料被細菌污染。2.4SDS-PAGE檢測將使用純化產(chǎn)品得到的樣品(包括流出組分、洗雜組分和洗脫組分)以及原始樣品使用SDS-PAGE檢測純化效果。3.在位清洗當填料使用過程中發(fā)現(xiàn)反壓過高或者填料上面出現(xiàn)明顯的污染時,需要進行在位清洗操作(Cleaning-in-Place,CIP)。建議按照下面操作去除填料上殘留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。去除強疏水結(jié)合的蛋白,脂蛋白和脂類通過使用30%異丙醇清洗5-10個柱體積,接觸時間為15-20分鐘可以去除此類污染物。然后,再使用10倍柱體積的去離子水清洗。也可以選擇使用含有去污劑的酸性或堿性溶液,清洗填料2倍柱體積。例如,含有0.1–0.5%非離子去污劑的0.1M醋酸溶液,接觸時間為1–2小時。去污劑處理后,需要使用70%的乙醇清洗5個柱體積,以徹底去除去污劑。***使用10倍柱體積的去離子水清洗。His ,gst,strep標簽蛋白純化及檢測。
Ni NTA Beads是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學(xué)方法偶聯(lián)了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),鎳離子處于八面體的中心,這樣的結(jié)構(gòu)很有效的保護了鎳離子免受小分子的進攻(產(chǎn)品結(jié)構(gòu)見圖1所示,三種產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的區(qū)別),更加穩(wěn)定,具體性能見表1。Ni NTA Beads可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件(見表2),適用性更廣,配體更穩(wěn)定,選擇性更高。 選蛋白純化試劑iu選上海楚知-天地人和帶正電荷的強陽離子交換介質(zhì)。湖南抗體純化試劑哪里買
抗體的純化原理與方法。浙江多肽試劑哪里買
試劑篇:三、根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進行分離蛋白質(zhì)純化流程1、電泳法:各種蛋白質(zhì)在同一pH條件下,因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質(zhì)作為載體,電泳時兩性電解質(zhì)形成一個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶一定電荷的蛋白質(zhì)在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用于分析和制備各種蛋白質(zhì)。2、離子交換層析法:離子交換劑有陽離子交換劑(如:羧甲基纖維素;CM-纖維素)和陰離子交換劑(二乙氨基乙基纖維素),當被分離的蛋白質(zhì)溶液流經(jīng)離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質(zhì)被吸附在離子交換劑上,隨后用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質(zhì)洗脫下來。浙江多肽試劑哪里買
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