使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應該沒問題。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應該沒有問題??纯凑f明書不就結了!我原來在CRO的時候一直是重復用的,也沒見什么不好??!短期會用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個月以內不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長時間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個東西強致疾病物,不建議使用。理論上截留目標物,孔徑應選1/3~1/5的膜;透過目標物,孔徑應選5-10倍的膜。超濾離心管通常被用于生物醫(yī)學、制藥、食品科學等領域中。杭州10K超濾離心管排行榜
避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質樣本處理,特別是較稀的蛋白質溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。江蘇再生纖維素離心管工廠使用超濾離心管時應注意遵循正確的操作流程和實驗室規(guī)范,并定期進行質量控制和評估。
超濾離心管,備有四種材質的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,運用壽命短;不銹鋼離心管強度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學腐蝕,但用時要防止接觸強腐蝕性的化學藥品、如強酸、強堿等化學試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴,倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。使用超濾離心管時應注意避免振動或震動造成樣品混亂并影響分離效果。
超濾離心管采用PH適用范圍普遍、蛋白結合力低、通量高、相容性強的PES聚醚礬膜制作而成。產品獨特的設計與制作工藝有利于降低溶質極化導致濾膜結垢,防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失、降低離心時間,提高樣本回收率(回收率>90%)、同時保持溫和的濃縮環(huán)境以保持蛋白的活性和構象。公司提供多種截留分子量的超濾離心管(10kD、30kD、50kD、10OkD),15ml離心過濾器可快速有效的濃縮純化多達15ml的生物樣品,,單支非滅菌包裝滿足實驗室常用需求。同時公司也支持OEM定制。超濾離心管是一種將離心力和超濾技術相結合的一次性過濾裝置,在生物實驗中為蛋白質樣本的濃縮、脫鹽和緩沖交換提供可靠的數(shù)據(jù),與層析、透析等方法相比,超濾離心管處理分子更加溫和,不需要有機萃取,不會導致蛋白變性,操作快速且簡單高效,在分離分子的同時,濃縮倍數(shù)得到了大幅提高,濃縮效率得到了明顯提升。在使用超濾離心管時,需要注意保持管子清潔、干燥和無污染。蘇州10K超濾離心管生產廠
超濾離心管也可用于免疫學研究和診斷,如T細胞啟用、細胞因子分析等。杭州10K超濾離心管排行榜
超濾作為一種膜分離技術,普遍應用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉子內; 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉 5000 xg,旋轉 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質,在過濾裝置的底部插入一個移液管,通過左右掃動的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達到較佳回收率,離心后應立即取出濃縮樣品。杭州10K超濾離心管排行榜