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血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。紹興細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清報(bào)價(jià)
為何血清會(huì)存在批間差?如何避免此影響?因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000種左右,每個(gè)批號(hào)的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對(duì)細(xì)胞的影響,XP建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試,篩選合適的批號(hào),備好庫(kù)存(血清未開(kāi)封時(shí),在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購(gòu)。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預(yù)防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。預(yù)防措施與建議:因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。上海標(biāo)準(zhǔn)血清胎牛血清是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻!胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對(duì)于細(xì)微差異即可決定成敗的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來(lái)說(shuō),選擇來(lái)源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關(guān)重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品,胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞,新西蘭, 美國(guó), 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會(huì)根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況,將胎牛血清分為特級(jí)胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過(guò)瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級(jí)胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國(guó)國(guó)產(chǎn)的胎牛血清在市場(chǎng)上并不多見(jiàn),這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導(dǎo)致的,另一方面也受到過(guò)度使用的影響。血清的主要作用是提供促接觸和生長(zhǎng)因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
很好的胎牛血清:好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無(wú)沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。國(guó)產(chǎn)血清,大多高于ph7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于ph7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚。宿遷OriCell血清
人和動(dòng)物的血清常用以進(jìn)行各種血清學(xué)試驗(yàn),幫助診斷疾病。紹興細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清報(bào)價(jià)
如何解凍血清?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。需要對(duì)新買(mǎi)的血清進(jìn)行過(guò)濾嗎?血清在ISO13485認(rèn)證的廠(chǎng)房中生產(chǎn),經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾,出廠(chǎng)經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè),污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè),結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買(mǎi)來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。紹興細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清報(bào)價(jià)