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胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)為細(xì)胞生長(zhǎng)提供必要的營(yíng)養(yǎng)成分,對(duì)于研究細(xì)胞的科學(xué)人士來說,血清都不會(huì)陌生,其中胎牛血清是實(shí)驗(yàn)操作的??汀R话愣?,胎牛血清是指懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟穿刺后,通過一系列工藝處理獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子自動(dòng)消失。胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來加熱已經(jīng)完全解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求,客戶可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。韶關(guān)不含外泌體血清供應(yīng)商
血清的保存應(yīng)該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點(diǎn)"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染,一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破壞而影響血清質(zhì)量。南通特級(jí)血清供應(yīng)商解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
避免產(chǎn)生沉淀物:請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。
血清的主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。胎牛血清的細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
非正規(guī)胎牛血清的產(chǎn)品會(huì)存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質(zhì)檢使胎牛血清存在生物學(xué)污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導(dǎo)致采集的原血放置時(shí)間過長(zhǎng)或操作不當(dāng)導(dǎo)致溶血,血液中血細(xì)胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,里面很多物質(zhì)都會(huì)對(duì)細(xì)胞有刺激作用,影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補(bǔ)?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進(jìn)行加工生產(chǎn),為了保障血清的培養(yǎng)效果會(huì)對(duì)血清進(jìn)行處理,較為常見的是添加、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BSA、生長(zhǎng)因子等,還有的會(huì)和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對(duì)所有生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都有巨大的影響。血清提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。十堰無外泌體血清價(jià)格
胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。韶關(guān)不含外泌體血清供應(yīng)商
國(guó)內(nèi)科研人員購(gòu)買胎牛血清的現(xiàn)狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國(guó)內(nèi)血清市場(chǎng)這幾年是愈發(fā)的混亂了,很多商家都盯上了這塊“蛋糕”,現(xiàn)在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)能見到的各種來源的血清品牌大于50種,使用者在不了解國(guó)家政策和相關(guān)知識(shí)的前提下很難去辨別和選擇安全、穩(wěn)定、合規(guī)的胎牛血清。另一方面是客戶很難找到血清相關(guān)的真實(shí)信息,即便想去分辨也無從下手,只能聽商家的了。現(xiàn)在允許進(jìn)口的血清產(chǎn)地很少,只有南美(烏拉圭)、澳大利亞、新西蘭。對(duì)血清行業(yè)有些了解的人看到這些,就會(huì)知道能夠進(jìn)口到國(guó)內(nèi)的胎牛血清注定是很少的。韶關(guān)不含外泌體血清供應(yīng)商
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