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胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。7.參與細(xì)胞凍存。在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來(lái)確定較佳濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。如果一次性無(wú)法用完一瓶血清,建議將胎牛血清無(wú)菌條件下分裝并儲(chǔ)存于-20℃。金華優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
胎牛血清如何采取?在牛屠宰過(guò)程中,如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕,就應(yīng)立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來(lái),在無(wú)菌條件下從子宮中取出小牛,進(jìn)行臍帶打結(jié)處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過(guò)導(dǎo)管被抽入無(wú)菌的血液收集袋內(nèi)。在沒(méi)有真空泵時(shí),也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過(guò)重力作用或按摩方式進(jìn)行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經(jīng)過(guò)離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個(gè)月,否則會(huì)因心臟太小而不便于操作。一個(gè)3月齡的胎兒可產(chǎn)生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產(chǎn)生350mL和550mL血清。黃山標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清廠家胎牛血清有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。
用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質(zhì)量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進(jìn)行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內(nèi)充分滋潤(rùn)容器內(nèi)壁;將胎牛血液置入上述滋潤(rùn)過(guò)的取血容器內(nèi),搖動(dòng)使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態(tài),然后將采的血試管在離心機(jī)中以3000-14000r/min轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測(cè)Antibiotic的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清之外)。國(guó)外,Antibiotic的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國(guó)內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾。
如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的胎牛血清?原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清,對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用特級(jí)胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細(xì)胞種類不同,我們建議客戶購(gòu)買前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠?,通過(guò)篩選得到滿意的血清批號(hào),之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨,以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。如何正確保存胎牛血清?需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱(未開(kāi)封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月,若一次無(wú)法用完一瓶,建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。血清提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。金華優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來(lái)的胎牛。金華優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
胎牛血清是血液凝固后的液體部分,不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的生長(zhǎng)因子。胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類、脂類及Hormone類物質(zhì)。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應(yīng)用很普遍。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人或獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。相對(duì)于新生動(dòng)物血清或成體動(dòng)物血清來(lái)說(shuō),胚胎期動(dòng)物血清有什么優(yōu)點(diǎn)?與其它類型血清相比,胚胎期動(dòng)物血清含有更多的生長(zhǎng)因子,及較少的gamma球蛋白含量。金華優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
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