如何區(qū)別真假胎牛血清:外觀,拿到血清,較先接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養(yǎng)經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要,顏色根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采的血過程的嚴謹規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產血清的點很分散,大多是由屠戶采的血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂??偟膩碚f,國產的血清呈現出蠟黃。進口的血清,質量較好的呈現出談黃、微紅色,差點的呈現出橘紅色或鮮紅色。當然,熱滅活胎牛血清或保存不當的血清,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現出暗紅,甚至咖啡色。血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質:氨基酸、維生素、無機物、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。深圳優(yōu)級血清哪里有
胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結血液的液體部分,不含細胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細胞生長至關重要的營養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養(yǎng)細胞的維持和生長至關重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質和Hormone。FBS應用普遍。FBS的主要用途之一是在真核細胞培養(yǎng)中,其濃度高達20%甚至更高,它提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養(yǎng)素和生長因子。然而,需要注意的是,人類細胞培養(yǎng)物中的FBS可能會引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類細胞與用FBS培養(yǎng)的細胞表現不同。FBS還用于人類和獸用疫苗以及生物技術藥物的研究、制造和控制,并用于阻止胰蛋白酶消化或用作冷凍保存中的保護劑。鹽城優(yōu)等血清品牌我們常會看到胎牛血清的標注上有對產品滅活也有沒有滅活的。
胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質Hormone傾向于干擾免疫測定系統和胰島素測定方法。2.透析,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。這包括極性和非極性分子。去除細胞因子、葡萄糖、氨基酸和許多其他物質。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產還是進口血清,都是不測Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內,Antibiotic的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養(yǎng)極為不利,這是國產血清質量差的根本原因。血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成。
用于體外細胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆茫粚⒀獫{分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中,向其中加入300-700mL去離子水,攪拌均勻,使用質量分數為10-20%的鹽酸溶液調節(jié)pH為7.0-7.3,將上述所收集的血漿倒入容器中,攪拌均勻,溫度設定為25-38℃,靜置8-20min,得混合液C;22)將上述的混合液C放入離心機中離心分離8-20min,轉速設定為3000-10000r/min,取上清液。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。舟山去外泌體胎牛血清哪家好
透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。深圳優(yōu)級血清哪里有
如果胎牛血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現,應該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質量。如果想要去除這些絮狀沉淀物,可以采取離心法,400g,離心1~2分鐘,將上清重新分裝即可使用。胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸蛋白、微量元素、生長因子等。深圳優(yōu)級血清哪里有
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