黃山細胞生物學膜片鉗應用

膜片鉗記錄的幾種形式：細胞吸附膜片(cell-attachedpatch)將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細胞膜表面上，形成高阻封接，在細胞膜表面隔離出一小片膜，既而通過微管電極對膜片進行電壓鉗制，高分辨測量膜電流，稱為細胞貼附膜片。由于不破壞細胞的完整性，這種方式又稱為細胞膜上的膜片記錄。此時跨膜電位由玻管固定電位和細胞電位決定。因此，為測定膜片兩側的電位，需測定細胞膜電位并從該電位減去玻管電位。從膜片的通道活動看，這種形式的膜片是極穩(wěn)定的，因細胞骨架及有關代謝過程是完整的，所受的干擾小。膜片鉗的應用：在心血管藥理研究中的應用。黃山細胞生物學膜片鉗應用

膜片鉗使用的注意事項：工作原理膜片鉗是一種能夠直接觀察單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易程度等特性的一種實驗技術。它的基本原理是以一個光潔，直徑約為0.5~3um的玻璃微電極同神經(jīng)或肌細胞的膜接觸，之后對微電極另一端開口處施加適當?shù)呢搲河秒姌O的纖細開口將與電極接觸的那一小片膜輕度吸入，如此在微電極開口處的玻璃邊沿以及這一小片膜周邊會形成緊密的封接，它的電阻能夠達到數(shù)個或數(shù)十個千兆歐，這世界上就是在化學上完全隔離了吸附在微電極開口處的那一片膜同膜的其余部分，通過微電極記錄到的電流變化光光和該膜片中通道分子的功能狀態(tài)相關聯(lián)。黃山全自動膜片鉗電生理技術設計公司膜片鉗是一種能夠直接觀察單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易程度等特性的一種實驗技術。

膜片鉗技術的應用范圍：①膜片鉗技術在通道中的研究；②與藥物作用有關的心肌離子通道研究；③對離子通道生理與病理作用機制的研究；④對單細胞形態(tài)與功能關系的研究；⑤對藥物作用機制的研究；⑥在心血管藥理方面的研究；⑦創(chuàng)新藥物研究與高通量篩選的研究；⑧在神經(jīng)科學中的研究。現(xiàn)如今，膜片鉗技術已經(jīng)大為普及，并普遍活躍在離子通道相關的研究當中。也許未來有1天，膜片鉗技術會過時，但兩百年來的探索歷程，數(shù)代學者們的心血，以及它在科學研究中的功績會一直被銘記。

膜片鉗記錄的幾種形式：內(nèi)面向外膜片(inside-out patch)　高阻封接形成后，在將微管電極輕輕提起，使其與細胞分離，電極端形成密封小泡，在空氣中短暫暴露幾秒鐘后，小泡破裂再回到溶液中就得到“內(nèi)面向外”膜片。此時膜片兩側的膜電位由固定電位和電壓脈沖控制。浴槽電位是地電位，膜電位等于玻管電位的負值。如放大器的電流監(jiān)視器輸出是非反向的，則輸出將與膜電流(Im)的負值相等。外面向外膜片(out-side patch)　高阻封接形成后，繼續(xù)以負壓抽吸，膜片破裂再將玻管慢慢地從細胞表面垂直地提起，斷端游離部分自行融合成脂質雙層，此時高阻封接仍然存在。而膜外側面接觸浴槽液。膜片鉗的應用：對藥物作用機制的研究。

膜片鉗法的各種模式：膜外面向內(nèi)模式：從全細胞模式將膜片微電極向上提起可得到切割分離的膜片，由于它的細胞膜內(nèi)側面面對膜片微電極腔內(nèi)液，膜外面自然封閉而對外，所以這個模式被稱為莫外面向內(nèi)模式。開放細胞吸附膜內(nèi)面向外模式：將細胞吸附模式的膜片以外的某部位的胞膜進行機械地破壞，經(jīng)破壞孔調(diào)控細胞內(nèi)液并在細胞吸附狀態(tài)下進行內(nèi)面向外的單一離子通道記錄。穿孔囊泡膜外面向外模式：從穿孔膜片模式將膜片微電極向上提起，便在微電極尖銳端處形成一個膜囊泡，如果條件較好，此膜囊泡內(nèi)不只有細胞質因子還可有線粒體等細胞器存在。膜片鉗使用的注意事項：在放大器打開時不能用手、金屬物品或其它導電的物品接觸電極絲。廣州醫(yī)學膜片鉗電生理技術原理

全自動膜片鉗系統(tǒng)技術指標：藥液交換迅速。細胞內(nèi)、外液的交換是在平面芯片上進行。黃山細胞生物學膜片鉗應用

膜片鉗電生理技術服務的數(shù)據(jù)如何處理：1.內(nèi)面向外式膜片細胞內(nèi)外和電極內(nèi)的溶液均可調(diào)控,既能較容易地改變細胞內(nèi)的離子或物質濃度,又能把酶等直接加于膜的內(nèi)側面,適宜研究胞內(nèi)物質對通道活動的影響。但實驗中難以改變膜外側物質,且需浸于低鈣液中。常用于研究依賴細胞內(nèi)鈣的離子通道,如鈣敏感的鉀通道,還可用于細胞內(nèi)和第二信使與通道的調(diào)節(jié)作用。2.外面向外式膜片能接觸膜的兩側,可以任意改變膜外物質的濃度,有利于研究離子、遞質對膜外表面的作用,多用于研究細胞膜外側受體控制的離子通道。這些受體直接作用于離子通道,而不需經(jīng)過第二信使系統(tǒng)。因細胞外液容易更換,故加藥方便。缺陷是實驗中難以改變胞內(nèi)成分,而且電極管內(nèi)必須充以低鈣液。黃山細胞生物學膜片鉗應用

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