如何區(qū)別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。國產的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,從采的血、冷凍、運輸?shù)缴a會經過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產生。澄清度,進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。揚州優(yōu)級血清
胎牛血清應該如何保存,可以存放多久?胎牛血清可長期儲存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請不要超過一個月。如果一次性無法用完一瓶血清,建議將胎牛血清無菌條件下分裝并儲存于-20℃,避免反復凍融。如何正確地解凍胎牛血清?采用逐步解凍法,將胎牛血清從-20℃冰箱轉入4℃冰箱融解,隨后分裝。切忌直接將胎牛血清從-20℃冰箱轉移至室溫解凍,這樣很容易因為溫度變化太大導致胎牛血清中的蛋白質凝集從而出現(xiàn)沉淀。淮安細胞培養(yǎng)用血清胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產、人或獸疫苗生產的質量控制及生物技術藥物的質量控制領域。
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產還是進口血清,都是不測Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內,Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細胞培養(yǎng)極為不利,這是國產血清質量差的根本原因。
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質會比水先融化。冰塊底部亮亮的細絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。回憶一下,細胞復蘇時,要保持細胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設2-8℃,所以各實驗室融化時間會稍有出入)。胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
胎牛血清對細胞貼壁中的作用:在細胞培養(yǎng)時,大部分來自實體組織感官的細胞會貼壁。它們在機體內時,也是與其他細胞或者細胞外基質結合的,貼壁對維持細胞的良好形態(tài)和促進細胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細胞,發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細胞,其增殖率也較高。人的造血干細胞培養(yǎng),更是需要有貼壁細胞構成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細胞包括成纖維細胞,巨噬細胞,上皮樣細胞,脂肪細胞,它們交錯連接,構成網(wǎng)狀支架結構。培養(yǎng)基中加入牛血清,對于粘附細胞的貼壁也很有幫助。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對細胞粘附都有促進作用。需注意,熱滅活小牛血清會降低血清對細胞粘附的促進作用,尤其在細胞旋轉培養(yǎng)時更為明顯。熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質,但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。揚州優(yōu)級血清
胎牛血清加熱可以滅活補體系統(tǒng)。揚州優(yōu)級血清
胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應在一周內用完。為保證細胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應于一周內用完。血清避免反復凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。揚州優(yōu)級血清
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