為什么要熱滅活胎牛血清?胎牛血清加熱可以滅活補體系統(tǒng)。開啟的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,開啟淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活胎牛血清。為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)少量沉淀?胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基。紹興OriCell胎牛血清
挑選胎牛血清:Antibiotic含量,Antibiotic的使用情況,也需考慮在內(nèi)。國內(nèi)外的血清,都不對Antibiotic進行測試(無四環(huán)素胎牛血清之外)。但相較于國內(nèi)Antibiotic的濫用,在其他國家,Antibiotic使用大多較為嚴格,用量有限,同時每頭牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含Antibiotic或者含量極低。內(nèi)的毒性含量,在挑選血清時,還應關(guān)注內(nèi)的毒性含量的高低。內(nèi)的毒性含量高,容易引起細胞衰老、凋亡等情況,好的血清,內(nèi)的毒性應該是極低的。因此,內(nèi)的毒性可作為血清等級評判標準之一,其含量的高低,在一定程度上,體現(xiàn)了血清品質(zhì)的優(yōu)劣。常州不含外泌體胎牛血清廠家胎牛血清保存條件是在-20°C凍存。
胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機抽氣口上。打開壓縮機,用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內(nèi)的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產(chǎn)還是進口血清,都是不測Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。反復凍融會破壞胎牛血清中有效成分,影響血清品質(zhì)。
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術(shù)指標,1、內(nèi)的毒性,標準為不高于5EU/ml。內(nèi)的毒性是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內(nèi)的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內(nèi)的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍??梢?,內(nèi)的毒性含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量極高,預示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。胎牛血清不推薦做熱滅活,因為胎牛還未有發(fā)育完全的補體系統(tǒng)。紹興OriCell胎牛血清
FBS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。紹興OriCell胎牛血清
胎牛血清的功能:胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。紹興OriCell胎牛血清
上海司鼎生物科技有限公司成立于2016-06-07,位于放鶴路1088號,公司自成立以來通過規(guī)范化運營和高質(zhì)量服務,贏得了客戶及社會的一致認可和好評。本公司主要從事免疫印跡(WB)技術(shù)服務,熒光定量PCR技術(shù)服務,膜片鉗電生理技術(shù)服務,在體光纖成像記錄技術(shù)服務領(lǐng)域內(nèi)的免疫印跡(WB)技術(shù)服務,熒光定量PCR技術(shù)服務,膜片鉗電生理技術(shù)服務,在體光纖成像記錄技術(shù)服務等產(chǎn)品的研究開發(fā)。擁有一支研發(fā)能力強、成果豐碩的技術(shù)隊伍。公司先后與行業(yè)上游與下游企業(yè)建立了長期合作的關(guān)系。司鼎;OriCell致力于開拓國內(nèi)市場,與醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)企業(yè)建立長期穩(wěn)定的伙伴關(guān)系,公司以產(chǎn)品質(zhì)量及良好的售后服務,獲得客戶及業(yè)內(nèi)的一致好評。我們本著客戶滿意的原則為客戶提供免疫印跡(WB)技術(shù)服務,熒光定量PCR技術(shù)服務,膜片鉗電生理技術(shù)服務,在體光纖成像記錄技術(shù)服務產(chǎn)品售前服務,為客戶提供周到的售后服務。價格低廉優(yōu)惠,服務周到,歡迎您的來電!