di yi節(jié)檢測(cè)抗原抗體的體外方法
抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)
抗原抗體結(jié)合的比例性與結(jié)合物的可見性抗原與抗體的結(jié)合能否出現(xiàn)肉眼可見的反應(yīng)，取決于兩者的比例。若比例合適，則可形成大的抗原抗體結(jié)合物，出現(xiàn)肉眼可見反應(yīng)現(xiàn)象；反之，雖能形成結(jié)合物，但體積小，肉眼不可見。由于這種分子比例的差異，分別形成了三種區(qū)帶現(xiàn)象。等價(jià)帶表示抗原與抗體比例蕞合適，形成大而多的結(jié)合物，此時(shí)在反應(yīng)體系中測(cè)不出或有極少游離的抗原或抗體；抗體過剩帶(前帶)和抗原過剩帶(后帶)皆表示抗原與抗體的比例不合適，所形成的結(jié)合物少且小，其反應(yīng)體系中存在著游離的抗原或抗體。小分子可溶性抗原，因其表面積大，容易導(dǎo)致后帶現(xiàn)象；而細(xì)胞等顆粒性抗原，在與抗體反應(yīng)時(shí)則易出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。因此在抗原抗體檢測(cè)中，為能得到肉眼可見的反應(yīng)，在了解抗原的物理性狀之后，對(duì)抗原或抗體進(jìn)行稀釋，以調(diào)整二者的比例。
抗原抗體反應(yīng)的階段性抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段。第一階段是抗原抗體的特異結(jié)合階段，此階段jin需幾秒到幾分鐘、尚無可見反應(yīng)；第二階段為可見反應(yīng)階段，需數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)乃至數(shù)日，受各種因素影響。 我們不斷推動(dòng)技術(shù)創(chuàng)新，為客戶提供先進(jìn)的微流控產(chǎn)品，幫助他們保持競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。江蘇介紹微流控產(chǎn)品水平
抗原抗體反應(yīng)的主要影響因素
(一)抗原和抗體濃度、比例抗原和抗體濃度、比例對(duì)抗原抗體反應(yīng)影響比較大，是決定性因素，如前所述。
(二)電解質(zhì)抗原與抗體特異性結(jié)合后，其親水性減弱，分子表面所帶的電荷易受電解質(zhì)影響而失去，復(fù)合物間的排斥力下降，導(dǎo)致第一階段已形成的可溶性結(jié)合物能進(jìn)一步聯(lián)結(jié)，出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。試驗(yàn)中常用0.85%的NaCl溶液作為稀釋液，以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。
(三)溫度適當(dāng)?shù)臏囟瓤稍黾涌乖c抗體分子碰撞的機(jī)會(huì)，加速結(jié)合物體積的增大，一般而言溫度越高，形成可見反應(yīng)的速度越快，但過高則會(huì)使抗原或抗體變性失活，影響試驗(yàn)結(jié)果。一般在37℃下進(jìn)行試驗(yàn)，但也有些抗原抗體在4℃下進(jìn)行反應(yīng)較好。
(四)酸堿度pH過高或過低都將直接影響抗原或抗體的理化性質(zhì)。例如，當(dāng)pH降至3.0左右時(shí)，因接近細(xì)菌抗原的等電點(diǎn)，細(xì)菌表面蛋白或其他基團(tuán)所帶的電荷消失，其相互間的排斥力喪失而導(dǎo)致非特異性酸凝集，影響試驗(yàn)的可靠性。 廣東分析儀器微流控產(chǎn)品蘇州含光微納科技有限公司的微流控產(chǎn)品經(jīng)過精密加工，能夠滿足各種高要求的實(shí)驗(yàn)需求。
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抗原與抗體的制備
抗原與抗體是血清學(xué)反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)?？乖闹苽渑c純化是獲得特異性抗體的先決條件，所得到的抗體又可反過來純化和檢測(cè)抗原。
抗原的制備抗原種類繁多，按其物理性狀可分顆粒性和可溶性兩類。前者指細(xì)胞性抗原(包括細(xì)菌抗原)，其制備較為簡(jiǎn)便，一般用新鮮細(xì)胞以無菌生理鹽水或磷酸緩沖液洗滌后配成一定濃度。若系細(xì)菌抗原，則取新鮮培養(yǎng)物，經(jīng)集菌作如下處理，H抗原因不耐熱用0.3%～0.5%甲醛處理，O抗原耐熱可加熱100℃2h去除H抗原后應(yīng)用?？扇苄钥乖梢允羌?xì)胞膜、細(xì)胞漿、細(xì)胞核及核膜等細(xì)胞組成部分，也可能是經(jīng)細(xì)胞分泌至體液中的一些可溶性因子。細(xì)胞組成部分常需經(jīng)過機(jī)械或酶解法等破碎、離心獲得粗制抗原，并通過選擇性沉淀或?qū)游龅确椒ㄟM(jìn)一步純化。而體液中(如血清等)的可溶性抗原則可直接用生化手段獲得所需成分。有些可溶性抗原jin具有免疫反應(yīng)性，而無免疫原性，此類抗原尚需與載體偶聯(lián)方可成為完全抗原。 含光微納的微流控產(chǎn)品具有良好的兼容性，能夠與其他設(shè)備和實(shí)驗(yàn)平臺(tái)無縫集成。上海微流控產(chǎn)品
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