抗體主要功能:調(diào)理吞噬和ADCC。1.調(diào)理作用(opsonization)指IgG抗體(特別是IgG1和IgG3)的Fc段與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用。例如,細(xì)菌特異性的IgG抗體可通過(guò)其Fab段與相應(yīng)的細(xì)菌抗原結(jié)合后,以其Fc段與巨噬細(xì)胞或中性粒細(xì)胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,通過(guò)IgG的Fab段和Fc段的“橋聯(lián)”作用,促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬。2.抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有殺傷活性的細(xì)胞(如NK細(xì)胞)通過(guò)其表面的Fc受體識(shí)別包被于靶細(xì)胞表面抗原(如病毒感染細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞)上的抗體的Fc段,直接殺傷靶細(xì)胞。NK細(xì)胞是介導(dǎo)ADCC的主要細(xì)胞。抗體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的,而表達(dá)Fc受體細(xì)胞的殺傷作用是非特異性的 [4] ??贵w的保護(hù)作用并非完全,某些病原體可能會(huì)發(fā)展出逃逸機(jī)制,繞過(guò)抗體的防御。浙江Prestige Antibodies抗體
多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進(jìn)行免疫。皮下多點(diǎn)注射法:①家兔兩側(cè)掌(跖內(nèi)各注射含有完全佐劑抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱兩側(cè)多點(diǎn)(頸、胸、腰椎各兩點(diǎn)、共 6 點(diǎn))皮下注射含不完全佐劑5的抗原,每點(diǎn) 0.50ml;③7~10 天后,脊柱兩側(cè)重復(fù)注射一次;④7~10 天后試血。不合格者重復(fù)步驟③。多途徑聯(lián)合注射法:①兩側(cè)掌(跖)內(nèi)側(cè)皮下注射含完全佐劑抗原 0.50ml(IgG 量為 5mg/ml) ;②14 天后,多點(diǎn)皮下注射含有不完全佐劑抗原;③7 天后,耳靜脈注射不含佐劑的抗原 2ml;④測(cè)定血清抗體效價(jià),不合格者重復(fù)步驟③,并適當(dāng)遞增 IgG 量。浙江Prestige Antibodies抗體抗體也可以在科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中被用作重要的工具。
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。抗體多樣性的原因主要有兩方面:1.外源性因素環(huán)境中抗原種類甚多,每種大分子抗原又有多種抗原表位,每種抗原表位均可選擇啟動(dòng)體內(nèi)一個(gè)B細(xì)胞克隆,產(chǎn)生一種特異性抗體。2.內(nèi)源性因素抗體多樣性的另一個(gè)原因是由基因的結(jié)構(gòu)及功能特征所決定的。編碼人Ig重鏈及κ、λ型輕鏈的基因分別位于第14、2、22號(hào)染色體上。其中編碼Ig重鏈的基因包括編碼可變區(qū)的V、D、J及編碼恒定區(qū)的C基因;編碼Ig輕鏈的基因包括編碼可變區(qū)的V、J及編碼恒定區(qū)的C基因。
抗體主要功能:?jiǎn)?dòng)補(bǔ)體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物使細(xì)胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應(yīng)抗原結(jié)合后,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露,從而通過(guò)經(jīng)典途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)的能力較強(qiáng),IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動(dòng)補(bǔ)體,但在形成聚合物后可通過(guò)旁路途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)。通常情況下,lgD不能啟動(dòng)補(bǔ)體。調(diào)理吞噬和ADCC。IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細(xì)胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。中和抗體是一種能夠中和病毒入侵的抗體,對(duì)病毒傳染具有重要意義。
多克隆抗體特異性鑒定:抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì),能夠識(shí)別并中和入侵機(jī)體的病原體。廣東多克隆抗體試劑
抗體的親和力決定了其與抗原結(jié)合的強(qiáng)度,高親和力的抗體能更有效地中和病原體。浙江Prestige Antibodies抗體
單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術(shù)是20世紀(jì)免疫學(xué)技術(shù)的一項(xiàng)里程碑式突破。該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合生成雜交瘤細(xì)胞,這種雜交瘤細(xì)胞核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體,繼承了親代細(xì)胞的特征。它既具有瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當(dāng)方法把雜交瘤細(xì)胞分離出來(lái),進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng),使之大量繁殖,在培養(yǎng)液中形成單個(gè)雜交瘤細(xì)胞的克?。ㄒ卜Q細(xì)胞系)。由于每個(gè)B淋巴細(xì)胞只有合成一種抗體的遺傳基因,所以單個(gè)雜交腐細(xì)胞的克隆也只能產(chǎn)生一種專一性抗體,即單克隆抗體。這種制備產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)被稱為單克隆抗體技術(shù)。浙江Prestige Antibodies抗體