抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個;編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個,編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細胞的分化發(fā)育過程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細胞克隆可識別相應的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細胞合成無數(shù)特異性抗體的主要原因??贵w調(diào)理在自身免疫性疾病等領域顯示出了巨大的潛力。廣州異嗜性抗體生產(chǎn)廠家
由雜交瘤單細胞克隆所產(chǎn)生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個抗原決定簇結(jié)合,抗體成分均一,抗體的結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過程中只要不發(fā)生變異,不同時間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能。用這種技術可按需要生產(chǎn)大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學方法所不能達到的。單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個階段。特別是全人源單克隆抗體,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類抗體藥物具有高親和力、高特異性、幾乎沒有毒副作用等優(yōu)點,克服了動物源抗體及嵌合抗體的各種缺點,成為調(diào)理性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢。蘇州專業(yè)抗體報價抗體的多樣性來自于基因重排和突變,使其能夠識別各種不同的抗原。
抗體基本結(jié)構(gòu):天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個氨基酸殘基組成。重鏈恒定區(qū)的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。據(jù)此,可將抗體分為5類(class),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相應的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。不同類的Ig具有不同的特征,如鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵的數(shù)量和位置、結(jié)構(gòu)域的數(shù)量及鉸鏈區(qū)的長度等均不完全相同。
多克隆抗體免疫動物:免疫劑量與注射途徑有關,一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,對家兔而言,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應大10 倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價的抗血清,宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者,可少量多次。免疫周期短者,應大量少次。 兩次注射的間隔時間應長短適宜,太短起不到再次反應的效果太長則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時間應為 5~7 天,加佐劑者應為 2 周左右。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過敏反應,如注射血清,即使是少量,在再次免疫時,極易引起過敏反應,所以一定要采取措施??贵w還可以通過啟動補體系統(tǒng)引發(fā)炎癥反應,吸引其他免疫細胞前來去除病原體。
多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應,不易大量制備,因而限制了其應用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細胞克隆,并使其在體外擴增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞,從而建立了單克隆抗體制備技術。抗體的半衰期較長,可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,保持免疫防御的持久性。蘇州專業(yè)抗體報價
抗體介導的細胞毒性可以直接殺傷傳染的細胞,起到去除病原體的作用。廣州異嗜性抗體生產(chǎn)廠家
單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術是20世紀免疫學技術的一項里程碑式突破。該技術將免疫小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合生成雜交瘤細胞,這種雜交瘤細胞核內(nèi)含有雙親細胞的染色體,繼承了親代細胞的特征。它既具有瘤細胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當方法把雜交瘤細胞分離出來,進行單個細胞培養(yǎng),使之大量繁殖,在培養(yǎng)液中形成單個雜交瘤細胞的克?。ㄒ卜Q細胞系)。由于每個B淋巴細胞只有合成一種抗體的遺傳基因,所以單個雜交腐細胞的克隆也只能產(chǎn)生一種專一性抗體,即單克隆抗體。這種制備產(chǎn)生單克隆抗體的技術被稱為單克隆抗體技術。廣州異嗜性抗體生產(chǎn)廠家