青浦區(qū)Merck細胞分析儀Merck儀器參數(shù)

來源: 發(fā)布時間:2022-02-15

疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液(10-0.63 ug)被轉移到Immobilon8-P膜上。印跡被阻止補充有0.5%脫脂奶粉(NFDM)的Tris緩沖鹽水含0.1%Tweeno 20表面活性劑(TBST),并用一級抗B-Tubulin進行探測(MAB3408)和次級HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。維護SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)清理去除協(xié)議每次使用時應清潔SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)。清理去除鹽堿中的鹽或污染物和管道,抽吸真空并通過系統(tǒng)沖洗散去的水。注:請勿對SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)進行高壓滅菌??梢圆鹦犊蚣埽⒂弥行郧鍧崉┫礈?,然后用蒸餾水徹底沖洗。風干。要拆卸框架,請使用右側的藍色夾子調整框架的方買細胞計數(shù)器就找益啟生物。青浦區(qū)Merck細胞分析儀Merck儀器參數(shù)

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15分鐘。圖4.擴展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化(1小時):,SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標準協(xié)議與標準免青浦區(qū)Merck細胞分析儀Merck儀器參數(shù)關于細胞分析儀的詢價電話。

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2.0系統(tǒng)計算SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)所需的抗體濃度用于標準免疫檢測的濃度標準SNAP i.d.o 2.0免疫檢測免疫檢測多印跡迷你印跡Midi污點_Ab濃度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗體量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗體量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比較終抗體稀釋1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗體庫存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每種抗體都是只有一個的,并且檢測試劑的靈敏度各不相同,因此可能有必要進行調整抗體或抗原濃度,使用的檢測試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時間。請注意,本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點濃度以獲得所需的性能。表2.封閉,抗體和洗滌的建議體積SNAP i.d.o 2.0SNA

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潤濕印跡。,對于大多數(shù)應用和大多數(shù)抗體而言,0.5%的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意:請勿使用濃度高于0. 5%的干奶,因為它可能會導致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液,請參閱表5了解兼容性和推薦濃度?!裨谙礈欤忾]和抗體緩沖液中始終使用0.1%Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力,并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中的免疫檢測時間很短,因此建議在開始操作之前應準備一抗和二抗稀釋液?!馦ultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL,Mini blot固定器為5 mL,10 mL用于Midi印跡固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot為15毫升),以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。青浦區(qū)Merck細胞分析儀Merck儀器參數(shù)