靜安區(qū)Merck離心濃縮管聯(lián)系方式

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-16

核苷酸截留分子量(NCO) 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標(biāo)定的,適合各種蛋白研究,但在核酸 和多糖純化時(shí)則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結(jié)構(gòu)容易漏 過(guò),相對(duì)于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更?。?。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長(zhǎng)度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實(shí)質(zhì)是溶質(zhì)累積在膜表面造成的堵塞,產(chǎn)生除了膜本身截留分 子量以外的過(guò)濾限制。當(dāng)溶質(zhì)濃度較高時(shí),會(huì)形成相當(dāng)于第二層濾膜作 用的膠體層,干擾分子通過(guò)濾膜,同時(shí)降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會(huì)影響目的分子的狀態(tài)而使?jié)獠顦O化現(xiàn)象加劇或減輕。超濾濃縮管的好處都有很多。靜安區(qū)Merck離心濃縮管聯(lián)系方式

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離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱(chēng)為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢(xún)技術(shù)支持專(zhuān)線(xiàn) 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱(chēng)分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量浦東新區(qū)默克2ml超濾濃縮管哪家好上海超濾濃縮管哪家比較好?

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截留 截留有時(shí)也稱(chēng)為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導(dǎo)致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn),我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間,也可參考Amicon? Pro完整操作說(shuō)明書(shū) 查看詳細(xì)信息。益啟生物公司的超濾濃縮管種類(lèi)繁多。

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蛋白如果濃縮過(guò)快或者過(guò)度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過(guò) 20mg/ml。對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進(jìn)方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時(shí)可以選擇30k) 3)在濃縮過(guò)程中取出超濾管,用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況,請(qǐng)先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用,如暫時(shí)不用,請(qǐng)保持潤(rùn)濕狀態(tài),避免重新干燥。對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。閔行區(qū)Merck離心濃縮管代理價(jià)格

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通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過(guò)程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時(shí) 會(huì)降低回收率。選擇膜和裝置時(shí)需要同時(shí)考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時(shí),流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái),甚 至可能隨著壓力的增加而降低。靜安區(qū)Merck離心濃縮管聯(lián)系方式

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