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特別推薦應(yīng)用（提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考） Microcon?超濾管： Microcon?PCR 級超濾管： ? 法醫(yī)鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀，離心法高效濃縮基因組DNA 應(yīng)用指南 典型應(yīng)用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養(yǎng)抽提物和細(xì)胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮（抗原，抗體，酶等） 從含有SDS（或無SDS）的緩沖液中濃縮gDNA 核酸濃縮與脫鹽（單鏈或雙鏈核酸） 去除標(biāo)記核苷酸 去除標(biāo)記氨基酸 從擴(kuò)增的DNA產(chǎn)物中去除引物 克隆前去除連接序列（linker）超濾濃縮管的好處有很多。浦東新區(qū)默克4ml超濾濃縮管代理商

這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用，其Ultracel?超濾膜對于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合，連同醫(yī)藥級O型圈封閉設(shè)計(jì)，確保更少的樣品丟失，更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì)，即使是小體積、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲濾過液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡便快捷，易于標(biāo)準(zhǔn)化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì)，醫(yī)用級O型圈密封，保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少。反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì)，即使樣品量很小也能獲得理想的得率，濃縮倍數(shù)可以達(dá)到20X。浦東新區(qū)Merck離心濃縮管銷售益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。

離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”，操作時樣品首先被濃縮，繼而加入新的溶液，再次濃縮時，原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時很多樣而復(fù)雜，過濾的過程中很重要的一點(diǎn)是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì)，但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括：? 標(biāo)稱分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）? 截留 ? 濃差極化 ? 通量

Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]購買超濾濃縮管就找益啟生物公司。

濃度：當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時，通量通常不受濃度影響。操作過 程中，隨著溶質(zhì)濃度的升高，增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。 溫度：粗體，作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴(kuò)散率增加 3-3.5%，同時溶液粘度降低。 實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來操作。 pH：改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu)，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀，產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的濃差極化，還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀，逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中，形成結(jié)晶和沉淀。上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。浦東新區(qū)默克4ml超濾濃縮管代理商

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對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產(chǎn)品使用說明書。另提供AAV（腺相關(guān)***）的制備方法供參考。 去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì)，當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度（Critical Micelle Concentration, CMC）時，去污劑分子會聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象，這有可能會影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析，可用緩沖液或Milli-Q?水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。浦東新區(qū)默克4ml超濾濃縮管代理商

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