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操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過(guò)濾（NFF）中液體在壓力或真空驅(qū)動(dòng)下直接流 過(guò)膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上，小分子則通過(guò)膜流出。NFF 常 用于無(wú)菌過(guò)濾、澄清預(yù)過(guò)濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過(guò)濾（TFF） 液體流過(guò)時(shí)與膜表面呈一定角度，被膜阻擋的大顆粒物不會(huì)累積在膜表 面，而且還會(huì)被切向流從膜表面掃除，因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法，而現(xiàn)在，TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計(jì)中，使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。靜安區(qū)默克離心濃縮管聯(lián)系電話

蛋白如果濃縮過(guò)快或者過(guò)度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過(guò) 20mg/ml。對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進(jìn)方法是： 1）離心力降為推薦離心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10k，此時(shí)可以選擇30k） 3）在濃縮過(guò)程中取出超濾管，用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況，請(qǐng)先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用，如暫時(shí)不用，請(qǐng)保持潤(rùn)濕狀態(tài)，避免重新干燥。靜安區(qū)默克離心濃縮管聯(lián)系電話超濾濃縮管的系列有很多。

7次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號(hào)）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹(shù)脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。

Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜，生產(chǎn)工藝嚴(yán)格，截留分子量明確而精細(xì)，蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白，那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少？ 按照經(jīng)驗(yàn)，建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)（10倍）。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的，但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒(méi)有做相關(guān)的測(cè)試，所以無(wú)法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì)，不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶，建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí)，以完全滅活RNA酶；殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。

外泌小體（Exosome）是一種囊泡結(jié)構(gòu)，直徑通常在30-150nm，常見(jiàn)于正常體液和病理樣本，培養(yǎng)細(xì)胞也可分泌。研究人員已經(jīng)在血液、唾液、尿液、母乳等中發(fā)現(xiàn)外泌小體，其運(yùn)載的蛋白和核酸涉及其細(xì)胞間物資、信息交流，影響和調(diào)控著多方面的生理功能，包括**的發(fā)生、免疫促進(jìn)、凋亡調(diào)控、血管的生成、炎癥的反應(yīng)及發(fā)育和分化等。由于在體液中出現(xiàn)，外泌小體對(duì)于臨床生物標(biāo)志物檢測(cè)來(lái)說(shuō)特別有利，成為體外診斷、biomarker研究的新熱點(diǎn)。上海超濾濃縮管供應(yīng)商。普陀區(qū)默克超濾濃縮管代理價(jià)格

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微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì)，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級(jí)，有時(shí)也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見(jiàn)，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí)膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過(guò)的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí)，孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過(guò)率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí)，需要謹(jǐn)慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。靜安區(qū)默克離心濃縮管聯(lián)系電話