福建值得信賴的HE染色分析

HE染色原理1、細胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。2、細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點（4.7—5.0）以下時，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。HE染色，南京英瀚斯，專業(yè)的實驗外包公司。福建值得信賴的HE染色分析

HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后，進行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機進行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進行染液染色的時候，染液可以充分進入組織種，同時，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。江西性價比高的HE染色報告HE染色觀察細胞形態(tài)變化。

HE染色結果判讀：細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細胞的種類有關，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時，伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標準：（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均勻，無皺褶無刀痕；（2）染色核漿分明，紅藍適度，透明潔凈，封裱美觀。

HE染色法的話，不能準確說出細胞器的顏色，實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色，胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色?；蛘咴敿氄f明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色 ；伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。南京英瀚斯，專業(yè)的技術提供專業(yè)的HE染色服務。

HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調(diào)整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調(diào)整時間)。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。HE染色是病理實驗中比較用的一種基礎染色方法。吉林比較好的HE染色

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HE染色原理：一、細胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。二、細胞漿染色原理：細胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系，當pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時，胞漿對外不顯電性，此時酸或堿性染料不易染色。當pH調(diào)到6.7-6.8時，大于蛋白質(zhì)的等電點pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽離子），就可被帶負電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料，在水中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽離子）結合而使細胞漿染色，細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比福建值得信賴的HE染色分析