英瀚斯生物為您整理免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟 1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h，脫蠟至水，用PBS沖洗三次，每次5min。 2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復(fù)，中火至沸后斷電，間隔10min低火至沸。 3、自然冷卻后PBS洗3次，每次5min...

免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的ca...

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的？ 實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法，對(duì)于組織形態(tài)保存好，且能...

免疫組化在在病理診斷中，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性，因此，深入研究免疫組化原理和技術(shù)，并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作，才能充...

做免疫組化時(shí)如何選擇一抗？ 1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體，...

確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位，臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源，進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽(yáng)性，而在肺canc...

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后，從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清，是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的...

細(xì)胞屬性的判定，免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用。通過(guò)特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分，來(lái)判定細(xì)胞的屬性，確定cancer的來(lái)源。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記，CK陽(yáng)性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記...

免疫組化的發(fā)展路程？在臨床病理診斷中，免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段，從20世紀(jì)70年代開(kāi)始，免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷，對(duì)于診斷cancer、cancer分類、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響，同時(shí)也擴(kuò)展了人們對(duì)于各種疾病及cancer形成過(guò)程的認(rèn)...

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷，進(jìn)而影響病理診斷，所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要，它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào)，密切配合和共同努力，病理醫(yī)生選擇抗體，設(shè)置對(duì)照，判讀結(jié)果，指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，保證染色...

免疫組化的結(jié)果分析： 免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照（或替代對(duì)照）（陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問(wèn)題；陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色）。一般情況下，陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為：Ag定位，包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)...

免疫組化分類中，免疫熒光方法，英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開(kāi)始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，先將已知抗體標(biāo)上熒光素，以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的...

免疫組化的顯色系統(tǒng) 免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)信號(hào)的關(guān)鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB（3,3'-二氨基聯(lián)苯胺）和AEC（3-氨基-9-乙基咔唑）。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀，適用于光學(xué)顯微鏡觀察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀，適用于...

免疫組化結(jié)果要如何分析？ （1）陽(yáng)性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法。在40*光鏡下，隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野，機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽(yáng)性著色細(xì)胞，每組3~6張不同動(dòng)物組織切片，然后進(jìn)行組間比較即可。 （2）灰密度分析法。可以通過(guò)在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相...

免疫組化（IHC）利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。 英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包，自有專業(yè)病理實(shí)驗(yàn)室，可高效完成免疫組化檢測(cè)。 抗體-抗原的相互作用通過(guò)有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELI...

免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù)，抗原修復(fù)的條件是什么？ （1）由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過(guò)程中，發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用，從而失去抗原性。通過(guò)抗原修復(fù)，使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露，提高抗原檢測(cè)率。 （2）修復(fù)方法...

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些？ 1、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索比較好濃度。 2、抗原修復(fù)不全，對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位，以利...

免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用？ 定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢(shì)。相比于其他蛋白檢測(cè)方法，免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高，是定位檢測(cè)分析優(yōu)先方法，尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定...

免疫組化在在病理診斷中，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性，因此，深入研究免疫組化原理和技術(shù)，并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作，才能充...

肺間質(zhì)纖維化主要特點(diǎn)之一就是肺問(wèn)質(zhì)膠原沉積，MMPs及其抑制因子在這一過(guò)程中發(fā)揮重要作用。肺泡上皮基底膜是一種特殊的ECM形式，Ⅳ型膠原是其重要組成成分。而MMP一2和MMP一9作用底物主要是Ⅳ型膠原，它們?cè)诜卫w維化發(fā)病中的作用日益受到重視。Selman等∞研...

免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過(guò)光鏡或電鏡，對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)...

免疫組化的質(zhì)量控制免疫組化的質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性和重復(fù)性的關(guān)鍵步驟。質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前的抗體驗(yàn)證、實(shí)驗(yàn)中的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，以及實(shí)驗(yàn)后的結(jié)果評(píng)估。抗體驗(yàn)證是通過(guò)Western blot或免疫熒光等方法驗(yàn)證抗體的特異性和靈敏度。陽(yáng)性對(duì)照是使用已知表達(dá)目...

確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位，臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源，進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽(yáng)性，而在肺canc...

免疫組化在臨床應(yīng)用中，還能及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶。英瀚斯生物專業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，一站式醫(yī)學(xué)科研平臺(tái)。采用常規(guī)病理方法難以檢出的實(shí)體瘤轉(zhuǎn)移稱為微小轉(zhuǎn)移灶。在常規(guī)組織切片中，辨別單個(gè)或幾個(gè)轉(zhuǎn)移性cancer細(xì)胞很難，淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生與某些cancer的早...

免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的ca...

免疫組化的特點(diǎn)： 1）特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會(huì)出現(xiàn)交叉...

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后，從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清，是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的...

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些？ 1、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索比較好濃度。 2、抗原修復(fù)不全，對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位，以利...

免疫組化的結(jié)果分析： 免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照（或替代對(duì)照）（陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問(wèn)題；陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色）。一般情況下，陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為：Ag定位，包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)...

免疫組化臨床應(yīng)用中，可以對(duì)傳染性疾病診斷。應(yīng)用抗病毒、細(xì)菌、zhen菌和寄生蟲(chóng)抗原的特異性抗體進(jìn)行免疫組化染色，可以檢測(cè)和診斷許多傳染性疾病病原微生物，如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(...