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HE染色知識(shí)點(diǎn)1:對(duì)送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,有特殊要求(如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識(shí)點(diǎn)2:組織取材要求在對(duì)送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上,根據(jù)診斷的需要,確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記,以便鏡檢時(shí)核對(duì)。另外,盡可能在取材前對(duì)有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,并編號(hào)存檔南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。HE染色結(jié)果如果使用計(jì)算機(jī)分析軟件分析?黑龍江性價(jià)比高的HE染色價(jià)格
HE染色常見(jiàn)問(wèn)題:Q3:細(xì)胞核染色過(guò)淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過(guò)短,或蘇木素過(guò)度氧化失效,或分化時(shí)間太長(zhǎng)。對(duì)策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個(gè)3-5min即可,接著重新染色。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來(lái)水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來(lái)水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過(guò)深,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過(guò)長(zhǎng);或切片太厚;或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。浙江推薦的HE染色檢測(cè)專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺(tái),南京英瀚斯生物。
HE染色法,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合使胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對(duì)比。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來(lái)。
HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法:1)二甲苯使用過(guò)久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長(zhǎng)拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少,幅度太??;可延長(zhǎng)脫蠟時(shí)間或以多振蕩來(lái)驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過(guò)久,導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過(guò)高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒(méi)有辦法滲透進(jìn)去,在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域):更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶?jī)?nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號(hào)驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò):需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò):需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短,切片上水分沒(méi)有烤干,也會(huì)導(dǎo)致著色不勻,出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。HE染色技術(shù)幾種常見(jiàn)的染色問(wèn)題。
HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu)。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,小葉分隔不明顯,但動(dòng)物如豬或小鼠,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周?chē)派錉钆帕?,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞。20倍物鏡下,肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核,細(xì)胞核大而圓,居中,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富,多成嗜酸性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時(shí),胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì)。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),等等,但是在光鏡下是無(wú)法看到的,需要在電鏡下才能觀察到。當(dāng)然,肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞,還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài),但是在HE染色時(shí)并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整、胞核有無(wú)增大、肝小葉形態(tài)是否完整,以檢測(cè)藥物等刺激因素對(duì)肝臟的損傷作用。石蠟組織切片的HE染色。廣東HE染色
比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。黑龍江性價(jià)比高的HE染色價(jià)格
HE染色常見(jiàn)問(wèn)題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時(shí)組織太厚,固定過(guò)久,導(dǎo)致深部組織固定不佳,而表淺組織過(guò)度固定,而透明、脫水、浸蠟均是如此,這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開(kāi)固定。(2)制片過(guò)程有問(wèn)題,切片厚薄不一,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時(shí),刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時(shí)間過(guò)短或脫蠟液使用過(guò)久,導(dǎo)致脫蠟不徹底。(4)染色液過(guò)少,著色不均勻;或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn),這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當(dāng)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。黑龍江性價(jià)比高的HE染色價(jià)格