免疫組化的結(jié)果分析:
免疫組化實驗通常需要設(shè)置陽性對照、陰性對照(或替代對照)(陽性對照是排除方法和實驗系統(tǒng)有無問題;陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色)。一般情況下,陽性對照顏色的特點為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強度不同(顏色深淺不一);陰性對照的特點為:染色細胞與組織無區(qū)別,顏色具有彌散性,分布均勻。
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說明:免疫組化實驗可以對結(jié)果進行定量分析,但要實驗得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結(jié)果才會比較準確。 英瀚斯生物為您詳解免疫組化實驗指南!江蘇免疫組化
免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,簡稱ICC)。這兩個詞大家經(jīng)常混著用,看著好像差不多,但實際上還是有點區(qū)別。IHCvsICC對于IHC,組織是來自患者或動物,經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細胞組分的定位,同時維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。對于ICC,大部分細胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液,來自患者或動物(如血涂片、拭子等),或在實驗室中進行的組織培養(yǎng)細胞系。 江蘇做得好的免疫組化有沒有能做免疫組化的實驗外包公司?效果好一點的。
在臨床應(yīng)用中,免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學基礎(chǔ)對cancer進行分類很困難。如胃腸道梭形細胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細胞cancer,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細胞cancer,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。
免疫組化的發(fā)展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀70年代開始,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,對于診斷cancer、cancer分類、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認識,提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術(shù),必須熟悉各種抗體真陽性反應(yīng)部位,實現(xiàn)實驗室間免疫組化標準化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關(guān)的實驗,可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。免疫組化怎么做?步驟方法?
免疫組化(IHC)利用抗體檢測組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。
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抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測或熒光染料熒光檢測進行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA,但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達譜對病理學家以及作為診斷工具都具有重要意義。
IHC實驗成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案,而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑。 關(guān)于免疫組化,你想知道的都在這里!內(nèi)蒙古細胞免疫組化多少錢
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免疫組化的特點:
1)特異性強。免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時,才會出現(xiàn)交叉反應(yīng)。
2)敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。
3)定位準確、形態(tài)與功能相結(jié)合。該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),可在組織和細胞中進行抗原的準確定位,因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察,這樣就可以進行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,對病理學領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義的。
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