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APP 轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物模型,神經(jīng)細(xì)胞 β-淀粉樣前體蛋白(APP)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型是將人源性 APP 基因與小鼠基因組整合、表達(dá)和遺傳。與正常動(dòng)物相比,APP 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物腦中Aβ表達(dá)過量,引起認(rèn)知功能障礙等系列AD臨床病理特征。
·PDAPP小鼠模型·轉(zhuǎn)人類APP695swe和APP717V-F基因的PDAPP小鼠模型是由C57BL/6鼠與DBA/2F1鼠雜合而生。PDAPP小鼠APP表達(dá)水平高,6~9月齡時(shí)在模型小鼠大腦多區(qū)域表現(xiàn)出與AD相似的病理表現(xiàn),如細(xì)胞外Aβ異常沉積、突觸丟失、神經(jīng)炎癥反應(yīng)和小膠質(zhì)細(xì)胞增生等,但NFTs形成不明顯。由于PDAPP小鼠在同月齡腦中Aβ沉積異常,主要用于與Aβ相關(guān)的AD疾病機(jī)制研究。
·Tg2576小鼠模型·Tg2576小鼠模型是轉(zhuǎn)人類APP695基因小鼠,在9~12個(gè)月時(shí)表現(xiàn)出學(xué)習(xí)記憶功能減退,在大腦多部位逐漸出現(xiàn)Aβ沉積和形成老年斑,在皮層出現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞聚集,該模型一般應(yīng)用于早期AD的研究。 小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型都有哪些?新疆推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建
卵巢早衰模型的建立
臨床的卵巢早衰(POF)是指卵巢功能提前減退,常見為女性在40歲以前出現(xiàn)閉經(jīng),以閉經(jīng),不育,雌***缺乏以及**水平升高為特征的一種疾病。在人群中發(fā)病率為1%~3%,在繼發(fā)性閉經(jīng)中占2%~10%,診斷以至少半年或半年以上閉經(jīng)多次發(fā)生,排除其他原因?yàn)榛A(chǔ),卵巢早衰是婦科分泌領(lǐng)域的常見病。
英瀚斯生物可承接各種生殖系統(tǒng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。
一.實(shí)驗(yàn)方法:
方法一:順鉑誘導(dǎo)大鼠卵巢早衰模型取雌性8周齡SD大鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)7d。腹腔注射順鉑2mg/kg,連續(xù)注射7d。
方法二:環(huán)磷酰酸誘導(dǎo)大鼠卵巢早衰模型取雌性8周齡SD大鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)7d。使用環(huán)磷酰酸給予腹腔注射,***次劑量為50mg/kg,以后8mg/kg連續(xù)注射14d。 新疆推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建服務(wù)就找英瀚斯。
裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動(dòng)物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細(xì)胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點(diǎn)。
造模方法:
1、細(xì)胞是貼壁細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細(xì)胞傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)至80-90%時(shí),去除培養(yǎng)基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化,將消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。倒掉上清后,加入3ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
2、將長(zhǎng)到培養(yǎng)皿80%-90%的細(xì)胞用胰酶消化下來,1000rpm離心,去除上清,加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,將細(xì)胞分別種在6孔板中,每孔種1×105個(gè)細(xì)胞。
3、將細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),將數(shù)量調(diào)整為2×107個(gè)細(xì)胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后,隨機(jī)分為3組,每組分別在右腋皮下接種2×106(100ul/只)細(xì)胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié),每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠,取裸鼠瘤拍照凍存。
消化系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型靠譜公司,找英瀚斯生物,東南大學(xué)國(guó)家大學(xué)科技園。
1胃黏膜對(duì)卵白蛋白過敏引起的胃潰瘍
【操作步驟】3月齡以上的多**鼠,雄雌不限,3μg卵白蛋白和1mg氫氧化鋁的混合物溶解于0.2ml鹽水,腹腔注射。
【結(jié)果分析】非洲多**鼠的過敏性潰瘍的大體形態(tài)與人類的消化性潰瘍極為相似。多**鼠對(duì)研究胃病也是一種合適的動(dòng)物,因?yàn)樗€存在另外兩種與人類相似的情況,即有發(fā)生類*與腺*的傾向。多**鼠可從日、美等國(guó)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)商處獲得。
2十二指腸潰瘍
【操作步驟】成年SD大鼠,雄雌不限,皮下注射丙腈或羥基乙胺200mg/kg,迅速引起進(jìn)行性十二指腸潰瘍?!窘Y(jié)果分析】使用該方法制備的模型病理形態(tài)改變與人類患者相似,潰瘍見于球部前壁,直徑2~4mm,常引起穿孔或穿透到內(nèi)臟,小的潰瘍常位于球部后壁,穿透至胰腺。模型可用于十二指腸潰瘍的發(fā)病機(jī)理、實(shí)驗(yàn)***的研究。 英瀚斯位于東南大學(xué)國(guó)家大學(xué)科技園,可承接實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的分類。人類疾病動(dòng)物模型種類很多,可按不同情況進(jìn)行分類,按產(chǎn)生原因分類,按系統(tǒng)范圍分類,按模型對(duì)象分類,按中醫(yī)體系分類。這里只列舉按產(chǎn)生原因分類的情況。按產(chǎn)生的原因可分為自發(fā)性動(dòng)物模型和誘發(fā)性動(dòng)物模型。
自發(fā)性動(dòng)物模型:突變性動(dòng)物模型(mutantanimalmodels):指未經(jīng)任何人工處理,利用動(dòng)物在自然條件下發(fā)生疾病來用作模型。抗病性動(dòng)物模型(negativeanimalmodels):是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上發(fā)生,從而探討為何這種動(dòng)物對(duì)該病有天然的抵抗力。異構(gòu)性動(dòng)物模型(differentconstructanimalmodels):是指利用健康動(dòng)物生物學(xué)特征來提供疾病模型。培育性動(dòng)物模型(breedinganimalmodels):是指通過遺傳育種手段將基因突變異常表現(xiàn)保留下來用作疾病模型。 英瀚斯生物,可做實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型驗(yàn)證藥物效果實(shí)驗(yàn)。新疆推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建
英瀚斯生物,可做實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型病理檢測(cè)。新疆推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建
阿爾茨海默病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。目前常用研究AD的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物與嚙齒類動(dòng)物,在選擇時(shí)遵循“減少、替代、優(yōu)化”的3R原則。非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物與人類的腦部解剖結(jié)構(gòu)、神經(jīng)病變特點(diǎn)以及生物行為模式相似,尤其是恒河猴,在其腦中觀察到含有Aβ沉積的老年斑和神經(jīng)原纖維纏結(jié)現(xiàn)象,無論是自發(fā)還是誘發(fā)模型,都能夠較好的復(fù)制AD相關(guān)的病理及生理特征,但是昂貴的費(fèi)用與稀少的資源限制了非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的大量應(yīng)用。嚙齒類動(dòng)物雖然在病變模擬方面不如非人靈長(zhǎng)類全方面的,但是具有價(jià)格低廉、資源范圍很廣的、生存率高等特點(diǎn),與人類的腦部解剖結(jié)構(gòu)與生理特征也較為相近,更適于誘導(dǎo)模型的大量制備,成為AD應(yīng)用更范圍很廣的的動(dòng)物模型。許多AD小鼠模型的背景品系是C57BL/6J小鼠,然而這種品系的小鼠似乎對(duì)類似AD的神經(jīng)病理學(xué)具有特別的抵抗力。新疆推薦實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建