重慶靠譜的eae模型如何構(gòu)建

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-07-19

利用EAE動(dòng)物模型,科學(xué)家們得以深入研究多發(fā)性硬化癥(MS)對(duì)大腦認(rèn)知功能的影響及其潛在干預(yù)手段。這一模型能夠模擬MS患者大腦神經(jīng)系統(tǒng)的病理變化,包括神經(jīng)纖維的脫髓鞘、神經(jīng)元損傷以及炎癥反應(yīng)等,從而為我們提供了一個(gè)獨(dú)特的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。通過(guò)觀察EAE動(dòng)物模型在認(rèn)知任務(wù)中的表現(xiàn),科學(xué)家們能夠評(píng)估MS對(duì)大腦認(rèn)知功能的損害程度,并探究其背后的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制。同時(shí),利用這一模型,科學(xué)家們還可以測(cè)試不同的干預(yù)手段,如藥物療愈、康復(fù)訓(xùn)練等,以評(píng)估它們對(duì)改善認(rèn)知功能的效果。因此,利用EAE動(dòng)物模型深入研究MS對(duì)大腦認(rèn)知功能的影響及其潛在干預(yù)手段,對(duì)于推動(dòng)MS的臨床療愈和研究具有重要意義。與對(duì)照組相比,EAE模型組小鼠脊髓中活化的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多。重慶靠譜的eae模型如何構(gòu)建

重慶靠譜的eae模型如何構(gòu)建,eae模型

EAE動(dòng)物模型的建立為多發(fā)性硬化癥(MS)的臨床研究提供了不可或缺的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。這一模型不僅模擬了MS在人體內(nèi)的病理過(guò)程,還使得科學(xué)家們能夠在控制實(shí)驗(yàn)條件的情況下,對(duì)疾病的發(fā)生、發(fā)展以及***反應(yīng)進(jìn)行深入研究。通過(guò)觀察和記錄EAE動(dòng)物模型在疾病進(jìn)程中的表現(xiàn),科學(xué)家們能夠收集到大量有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),為MS的發(fā)病機(jī)制、病理變化以及***效果的評(píng)估提供重要依據(jù)。此外,EAE動(dòng)物模型還為新藥物的研發(fā)和現(xiàn)有***方法的優(yōu)化提供了實(shí)驗(yàn)平臺(tái),使得科學(xué)家們能夠在動(dòng)物體內(nèi)測(cè)試藥物的有效性和安全性,為MS的臨床***提供更加可靠的依據(jù)。因此,EAE動(dòng)物模型的建立對(duì)于推動(dòng)MS的臨床研究具有重要意義。江西專門做eae模型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包通常采用主動(dòng)誘導(dǎo)法制備EAE模型,將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動(dòng)物體內(nèi)。

重慶靠譜的eae模型如何構(gòu)建,eae模型

多發(fā)性硬化(Multiple sclerosis,MS)是一種病因不明的主要累及***系統(tǒng)蛋白質(zhì)的慢性炎性脫髓鞘疾病。其病理特征是血管周圍炎***變,髓鞘破壞,星型細(xì)胞增值,少突膠質(zhì)細(xì)胞和軸索缺失。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental autoimmune encephakmyelitis EAE)是目前國(guó)際公認(rèn)的研究MS的動(dòng)物模型,比較常用的致敏原多為腦或脊髓組織勻漿、髓鞘蛋白成分或其多肽片段等。由于髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)存在于髓鞘和少突膠質(zhì)細(xì)胞的比較外層,具有高度免疫原性,MOG和抗MOG抗體在MS的發(fā)病過(guò)程中起重要作用,用MOG誘導(dǎo)的EAE可以作為研究MS的理想模型。

目前主要由三種髓鞘蛋白(或蛋白多肽)用于誘發(fā)EAE模型的研究:髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG),髓鞘堿性蛋白(MBP)和髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP)※MBP是**早用來(lái)EAE研究的髓鞘抗原,多以誘發(fā)急性EAE(AcuteEAE)模型。※MOG是目前常用建立EAE模型的髓鞘抗原,多以誘發(fā)慢性EAE(ChronicEAE)模型※PLP也是常用建立EAE模型的髓鞘抗原,模型呈現(xiàn)緩解-復(fù)發(fā)的特點(diǎn),多用來(lái)建立復(fù)發(fā)-緩解型(RelapseremittingEAERR-EAE)模型。以上三種是常見(jiàn)的誘導(dǎo)eae模型的蛋白。EAE模型是人類MS的經(jīng)典動(dòng)物模型,能夠?yàn)镸S提供充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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獲取實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,并檢測(cè)其特性。方法取8周齡,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至發(fā)病高峰期(第15天)時(shí)以PBS灌注后取小鼠后腦和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通過(guò)100μm濾網(wǎng)濾過(guò),而后采用Percoll密度梯度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,進(jìn)一步利用CD11b與CD45抗體染色,通過(guò)流式細(xì)胞儀分選CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)細(xì)胞,即分別得到相對(duì)活化和靜息的小膠質(zhì)細(xì)胞,***對(duì)流式分選獲取的小膠質(zhì)細(xì)胞行qPCR檢測(cè)。結(jié)果通過(guò)形態(tài)比較,獲得了高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞。FIZZ-1基因行qPCR檢測(cè),結(jié)果顯示在EAE急性期M2型小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多,符合文獻(xiàn)報(bào)道。結(jié)論該方法能從EAE小鼠體內(nèi)分離獲取高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞,可用于相關(guān)目的基因后續(xù)檢測(cè)。可以在猴、大鼠、小鼠等動(dòng)物制備EAE模型。寧夏比較好的eae模型

EAE模型反映人類的MS不同臨床,免疫學(xué)和組織學(xué)方面的多樣性。重慶靠譜的eae模型如何構(gòu)建

不同品種或同一品種不同品系動(dòng)物對(duì)EAE模型的易感性主要受免疫反應(yīng)基因(Ir基因)影響,Ir基因的調(diào)節(jié)作用表現(xiàn)為T細(xì)胞表面受體對(duì)髓鞘堿性蛋白(MBP)的特異性表達(dá)。動(dòng)物的種類不同,其受體表達(dá)能力不同,對(duì)自身抗原的反應(yīng)性不同,因而對(duì)EAE的易感性也不同,因此在選擇動(dòng)物時(shí)需要尋找EAE模型的敏感動(dòng)物。鑒于對(duì)EAE模型敏感的Lewis、DA大鼠,PL/J,SJL/J小鼠的價(jià)格更加昂貴、不宜獲得且難以飼養(yǎng),國(guó)內(nèi)多采用價(jià)廉易得的Wistar大鼠,但其敏感性不及前者。重慶靠譜的eae模型如何構(gòu)建