HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過度應及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。關于HE染色,常用的結果分析原理。海南結果客觀的HE染色分析
HE染色細胞核灰藍原因:(1)組織處理溫度過高、過熱,在石蠟停留的時間過長;(2)固定時間太短,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策:理論上來說,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過長時間。如果由于某些原因不能進行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。河北值得信賴的HE染色分析HE染色的基本原理和結果分析。
HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。H:Hematoxylin,蘇木精E:Eosin,伊紅蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色,被堿染料染色的結構具有嗜堿。伊紅(,E)是一種酸染料,能將細胞質染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。 很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時,伊紅著色由淺變深。
HE染色法的話,不能準確說出細胞器的顏色,實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色?;蛘咴敿氄f明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。常規(guī)HE染色和特殊染色服務。
HE染色等常規(guī)染色,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,并且對抗原基本無影響。脂質染色(油紅O染**odipy染色,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,膽固醇染色。如果標本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,將標本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內固定(在固定液內邊解凍邊固定)。組織形態(tài)結構保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。海馬組織HE染色如何觀察。質量好的HE染色分析
HE染色是病理實驗中比較用的一種基礎染色方法。海南結果客觀的HE染色分析
HE染色觀察細胞凋亡,凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后,在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備:對于貼壁細胞,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細胞長于玻片上,然后用藥物誘導細胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞,用藥物誘導細胞凋亡后,離心1000r/min收集細胞,用PBS洗2次,收集調整細胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學顯微鏡下,貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍色或藍黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細胞,整個細胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質顏色加深等。海南結果客觀的HE染色分析