湖北值得信賴的外泌體測(cè)序

外泌體（Exosome）是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150nm的小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中；外泌體攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、RNA等重要信息，不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院李偉華等人在MolecularCancer雜志發(fā)表的有關(guān)外泌體研究的綜述：分別介紹了1、外泌體在慢性乙型肝炎至肝細(xì)胞*過(guò)程中的作用2、外泌體與肝細(xì)胞*的關(guān)系3、外泌體在肝*診斷和預(yù)后中的應(yīng)用4、外泌體在肝****中的應(yīng)用，對(duì)相關(guān)涉及的***研究?jī)?nèi)容進(jìn)行總結(jié)以揭示外泌體在肝*的發(fā)***展，診斷和***中的重要性，為研究人員進(jìn)一步闡明外泌體在肝*中的作用機(jī)制，并促進(jìn)外泌體在臨床診斷中的應(yīng)用和肝*的***提供參考。外泌體與疾病的研究，南京英瀚斯生物。湖北值得信賴的外泌體測(cè)序

外泌體的提取方法有多種：包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心，以及后來(lái)發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經(jīng)細(xì)胞分泌后存在于體液或者血液中，故檢測(cè)外泌體的樣本一般為血液（全血、血漿）、體液（尿液、唾液、腦脊液、羊水、唾液等）、細(xì)胞上清液。提取所需要樣本量血清：樣本量>5ml（全血10ml）。血漿：樣本量>5ml（全血10ml）。體液：樣本量>20ml。細(xì)胞培養(yǎng)上清液：樣本量>20ml。上海專門(mén)做外泌體價(jià)格外泌體檢測(cè)服務(wù)，經(jīng)驗(yàn)豐富，操作熟練。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少。四是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。五是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度比較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法比較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體

外泌體參與了機(jī)體不同的生理和病理過(guò)程，并對(duì)細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮重要的調(diào)控作用，如免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細(xì)胞類型特異性，即不同細(xì)胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同，這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標(biāo)志物的潛力。此外，外泌體在作為基因和藥物運(yùn)載、**和**生物學(xué)等方面也已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中，如細(xì)胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等，我們可以選擇不同的樣本來(lái)源進(jìn)行相關(guān)的外泌體研究。不同的實(shí)驗(yàn)樣本采集時(shí)需要注意的地方不一樣，如細(xì)胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無(wú)外泌體血清或者無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，以降低背景值的干擾。南京英瀚斯，外泌體檢測(cè)服務(wù)，分離鑒定都能做。

外泌體的分離對(duì)于理解它們的作用機(jī)制和它們?cè)谏镝t(yī)學(xué)科學(xué)中的應(yīng)用是至關(guān)重要的。一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)成功地利用諸如超離心法、超濾法、層析法、基于聚合物的沉淀法和抗體偶聯(lián)磁珠的親和捕獲等技術(shù)分離外泌體。已有研究表明，密度梯度離心法可以分離出比較純凈的外泌體。1983年外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而比較近幾年，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。比較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用。外泌體檢測(cè)服務(wù),醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn),醫(yī)學(xué)模型構(gòu)建。湖南專門(mén)做外泌體檢測(cè)

外泌體那些事兒，南京英瀚斯生物。湖北值得信賴的外泌體測(cè)序

外泌體提取之后利用電鏡來(lái)分析其大小和形態(tài)，利用流式細(xì)胞儀來(lái)分析細(xì)胞表面標(biāo)記，通過(guò)Western blot和ELISA等方法對(duì)蛋白進(jìn)行分析，或通過(guò)qPCR和新一代測(cè)序（NGS）來(lái)分析RNA。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在分離exosome時(shí)，約有56%的人采用超速離心法，說(shuō)明這種方法仍是目前的金標(biāo)準(zhǔn)方法。不過(guò)這種方法缺點(diǎn)也不少：耗時(shí)耗力，往往需要8-30個(gè)小時(shí)；每次比較多只能處理6個(gè)樣品；需要大量的起始材料；產(chǎn)量不高。商業(yè)化的exosome提取試劑盒已經(jīng)上市，更為簡(jiǎn)單省事。湖北值得信賴的外泌體測(cè)序