江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學(xué)染色法，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍(lán)液返藍(lán)，流水沖洗。3、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結(jié)果判讀：細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色HE染色規(guī)范化流程以及注意事項。江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時間過長；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時，停留時間相對均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對策：每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。陜西性價比高的HE染色分析HE染色是組織學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ)、使用比較普遍的技術(shù)方法之一。

HE染色分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后，必須用0.5%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去，在進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此，在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用：分化之后，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色，故分化之后，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時間較長。

HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤，這樣會導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。HE染色的基本原理和結(jié)果分析。

HE 染色是病理的主要常規(guī)染色，其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y，藉由電荷與吸附性的差異，組織結(jié)構(gòu)對不同染料的結(jié)合程度不同，我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核，Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì)，染色優(yōu)良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異，而且每個實驗室需要的顏色深淺不一，使用者可以依自己的需求另行調(diào)整，以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色取材、染色以及分析方法介紹。吉林結(jié)果客觀的HE染色檢測

骨組織HE染色的操作流程。江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改變組織等電點，促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合，其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高，很短時間就導(dǎo)致核漿共染時，可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%)，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時間，同時也能提高蘇木素染色的清晰度?，F(xiàn)在有商用的HE染色液賣，但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測