福建做得好的免疫組化可以做什么

來源: 發(fā)布時間:2021-11-24

免疫組化在臨床應(yīng)用中,還能及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶。英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務(wù),一站式醫(yī)學(xué)科研平臺。采用常規(guī)病理方法難以檢出的實體瘤轉(zhuǎn)移稱為微小轉(zhuǎn)移灶。在常規(guī)組織切片中,辨別單個或幾個轉(zhuǎn)移性cancer細(xì)胞很難,淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生與某些cancer的早期轉(zhuǎn)移有時也不易區(qū)別,而采用免疫組化方法,有助于及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小(cancer)轉(zhuǎn)移灶。對乳腺cancer而言主要是腋窩淋巴結(jié)的檢測,淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移患者預(yù)后差,這對進一步醫(yī)療和預(yù)后判斷十分有意義。免疫組化相關(guān)知識匯總。福建做得好的免疫組化可以做什么

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做免疫組化時如何選擇一抗?

1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免)。

2、應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至標(biāo)明石蠟切片或冰凍切片。

3、種屬反應(yīng)性的選擇(speciesreactivity)。這一點很重要,表明這種抗體可能存在種屬差別,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內(nèi)的抗原。

4、種屬來源,一般兔來源的多是多克隆抗體;而小鼠來源的多是單克隆抗體,但也有另外。根據(jù)此來源來選擇相應(yīng)的二抗。

5、生產(chǎn)廠家的選擇。


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確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤,用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來源,進一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結(jié)蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù)。

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對其染色結(jié)果的判斷,進而影響病理診斷,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),密切配合和共同努力,病理醫(yī)生選擇抗體,設(shè)置對照,判讀結(jié)果,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進行實驗操作,保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環(huán)節(jié),每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測結(jié)果,如抗原保存,蛋白酶消化,增強技術(shù)及對抗體的管理、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果。動物、細(xì)胞的免疫組化、免疫熒光,就找英瀚斯生物!

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免疫組化臨床應(yīng)用中,可以對傳染性疾病診斷。應(yīng)用抗病毒、細(xì)菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進行免疫組化染色,可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、細(xì)小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等,由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時性、低風(fēng)險性、高敏感性、特異性、有效性等特點,可以用于(1)用于人類新病原微生物的識別;(2)提供快速的形態(tài)學(xué)診斷,使嚴(yán)重傳染性疾病得以早期醫(yī)療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養(yǎng)方法的情況下,提供診斷并對發(fā)病機制進行研究和認(rèn)識。英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務(wù),一站式醫(yī)學(xué)科研平臺。病理免疫組化多少錢?福建做得好的免疫組化可以做什么

做免疫組化的目的是什么?福建做得好的免疫組化可以做什么

免疫組化實驗注意事項總結(jié):

?本實驗室所用切片一般是石蠟切片。

?烘片:使蠟片水分蒸發(fā),石蠟軟化,組織切片牢固貼在玻片上;烘片至跟烘片前透明度有差異。

?抗原修復(fù)時,使片子始終浸沒在修復(fù)液中,液體不能干。

?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱,濕盒放置1h,省時間和結(jié)合效果好,不要超過1h,容易過染。

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?二抗使用:兩個二抗放大信號或一個二抗;若抗體信號強,可不用放大信號,盡量增大信噪比。

?10XDAB在常溫溶解,盡可能現(xiàn)用現(xiàn)配,放于4度儲存時間久了效果不佳。

?復(fù)水和脫水時所用的梯度酒精不可混用,要區(qū)分開。

?加抗體和顯色液時,都要將片子甩干,在半干半濕的狀態(tài)下再加,不然容易造成溶液的二次稀釋。

?整個操作過程中在顯色之前,一定不能干片。 福建做得好的免疫組化可以做什么

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